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文檔簡介
1、后期促進復合物或周期體(The anaphase-promoting complex orcyclosome，APC/C)是一個泛素連接酶復合體，它控制著細胞分裂的中期向后期的轉換。在細胞中期，當染色體與紡錘絲正確連接時，Cdc20激活APC/C，進而啟動一系列泛素化反應，染色體開始分離。這是一個保證細胞有絲分裂正常進行的重要機制。同樣，其在減數分裂中也有著相同的作用。本研究中，我們分析了體外培養(yǎng)的卵母細胞中的Cdc20的表達情況，并對
2、Cdc20進行了表達調控。我們構建了Myc-Cdc20載體，在將載體反轉錄成為cRNA之后通過顯微注射的方法進行Cdc20的過量表達。此外，我們還通過western blot的方法檢測了正常體外培養(yǎng)條件下的GV、GVBD、MⅠ和MⅡ期卵母細胞的Cdc20的表達情況。
首先，我們確定了在本實驗室體外培養(yǎng)條件下的絨山羊卵母細胞成熟率和細胞到達GVBD、MⅠ和MⅡ期所需的時間。結果顯示，在我們的培養(yǎng)條件下，卵母細胞成熟率為75％。8
3、小時，卵母細胞發(fā)生GVBD，18小時到達MⅠ期，24小時后，有75％的卵母細胞排出第一極體，到達MⅡ期。
然后，我們將Myc-Cdc20 cRNA注射到到卵母細胞并進行體外培養(yǎng)，10小時后，我們檢測到了MYC-CDC20融合蛋白的表達。但是，成熟時間和成熟率與正常條件下的體外培養(yǎng)并無差異性顯著。我們通過western blot的方法檢測了正常培養(yǎng)條件下的絨山羊卵母細胞GV期到MⅡ期CDC20蛋白的表達情況，結果表明從GV期到M
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