三種揮發(fā)性芳香物質(zhì)對(duì)柑橘采后酸腐病菌作用初探.pdf

1、酸腐病是一種嚴(yán)重的柑橘采后病害。近幾年來，由于大多數(shù)地方加強(qiáng)了對(duì)于青、綠霉病這二種病害的防治后，柑橘酸腐病在各地的發(fā)病率逐漸提高，并且有著爆發(fā)的趨勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)分離純化得到一株病原菌并鑒定，研究了其基礎(chǔ)生物學(xué)特性。GC-MS分析了不同貯藏時(shí)間椪柑精油組成并探討了上述精油和主要潛在抑菌組分對(duì)酸腐病菌的抑菌作用以及機(jī)理。具體結(jié)果如下：
　　（1）酸腐病菌分離鑒定和致病性檢測(cè)以及基礎(chǔ)生物學(xué)特性
　　本實(shí)驗(yàn)從自然發(fā)病的宮川果實(shí)表面分離分

2、離純化得到一株柑橘采后致病菌，并根據(jù)形態(tài)學(xué)特征和 rDNA-ITS相結(jié)合的方法鑒定為酸腐病菌(Geotrichum citri-aurantii)。致病力檢測(cè)結(jié)果顯示酸腐病菌從發(fā)病到全果腐爛只需11 d；基礎(chǔ)生物特性研究結(jié)果顯示：菌絲體最適生長(zhǎng)溫度28°C；在pH為4.0時(shí)菌絲體生長(zhǎng)旺盛；孢子致死溫度為85°C；此外光照對(duì)菌絲體生長(zhǎng)作用不明顯。
　　（2）不同貯藏時(shí)間椪柑皮精油成分GC-MS分析及抑菌作用
　　選取椪柑作為實(shí)

3、驗(yàn)材料，采用水蒸汽蒸餾法提取不同貯藏時(shí)間椪柑皮精油，并進(jìn)行GC-MS分析。結(jié)果顯示，不同貯藏時(shí)間椪柑精油的主要化學(xué)成分萜烯烴類化合物（89.18％~90.82%）、醇(4.89%~5.54%)、醛(4.22%~5.28%)和醚(0%~0.10%)等；其中，含量最高的組分為檸檬烯(62.50%～63.33%)，約占總含量的三分之二。不同貯藏時(shí)間椪柑精油抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明：在0~10μL/mL時(shí)，貯藏5、10和15 d的精油都是促進(jìn)酸腐病菌菌

4、絲體的生長(zhǎng)，但是隨著濃度的增加，這種促進(jìn)效果減弱了。當(dāng)10 d椪柑精油濃度為10μL/mL時(shí)，促進(jìn)作用最小(0.71%)。當(dāng)5 d椪柑精油濃度為5μL/mL時(shí)，促進(jìn)作用最大(42.22%)。當(dāng)20 d椪柑精油濃度為10μL/mL，抑制率為7.06%。
　?。?）六種揮發(fā)性芳香物質(zhì)對(duì)酸腐病菌的抑菌作用
　　采用濾紙片法對(duì)檸檬醛、辛醛、壬醛、癸醛、松油醇、芳樟醇、β-蒎烯的抑菌活性進(jìn)行了初步的篩選。結(jié)果顯示：在醛類中，檸檬醛和辛

5、醛對(duì)供試菌都顯示了很強(qiáng)的抑菌活性；在醇類中，α-松油醇顯示了比較強(qiáng)的抑菌活性。這三種芳香物質(zhì)的MIC和MFC結(jié)果如下：檸檬醛(MIC：0.50μL/mL，MFC：1.00μL/mL)；辛醛(MIC：0.50μL/mL，MFC：2.00μL/mL)和α-松油醇(MIC：2.00μL/mL，MFC：4.00μL/mL)。選出檸檬醛、辛醛和α-松油醇進(jìn)行抑菌機(jī)理的研究。
　?。?）檸檬醛、辛醛和α-松油醇對(duì)酸腐病菌的抑菌機(jī)理研究

6、　　經(jīng)過最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MFC)的檸檬醛、辛醛和α-松油醇處理后，通過菌絲體的掃描電鏡圖片觀察到菌絲體形態(tài)學(xué)發(fā)生了很大的改變，細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)了不同程度的泄漏;細(xì)胞物質(zhì)在260 nm下發(fā)生大量釋放，并隨著濃度增加而增加，在MFC檸檬醛處理2 h達(dá)到了最大吸收度(0.636);胞外電導(dǎo)率顯著增加和胞外pH的變化驗(yàn)證了細(xì)胞膜的通透性增加了;細(xì)胞總脂質(zhì)含量降低，其中，檸檬醛、辛醛和α-松油醇濃度MFC處理的酸腐霉菌細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含