大黃魚TLR13、TLR7和TLR8的分子特征與免疫功能的初步研究.pdf

1、Toll樣受體(TLRs)是一類保守的跨膜蛋白家族，是典型的用于檢測入侵病原體的分子傳感器。它們能夠廣泛的識別病原相關分子模式(PAMPs)，如細菌和真菌的細胞壁成分、細菌脂蛋白、細菌和病毒的核酸;識別PAMPs后緊接著級聯(lián)效應，促進炎癥反應、激活先天性免疫和適應性免疫應答。大黃魚(Pseudosciaenacrocea)是我國重要的海水經濟養(yǎng)殖魚種，本研究中，我們克隆和鑒定了大黃魚內三個TLRs，Lyc TLR13，LycTLR7和L

2、ycTLR8，希望有助于加深對大黃魚先天性免疫的認識，同時為大黃魚病害防治提供新的思路。
　　 Lyc TLR13，LycTLR7和LycTLR8的全長分別是2745 bp，3165 bp，3093 bp，依次編碼914，1054，1030個氨基酸的蛋白。這三個蛋白具有典型的Toll樣受體結構域:胞外段有數個富含亮氨酸的重復序列(Leucine-rich repeats，LRR)，胞內段有一個保守的Toll/IL-1受體區(qū)域(T

3、oll/IL-1 receptor domain，TIR)。值得注意的是LycTLR7胞外區(qū)比LycTLR8和LycTLR13多一個N-端LRR序列(LRR-NT)。此外，我們還在LycTLR7和LycTLR8胞外區(qū)域的氨基酸序列上發(fā)現了保守的CxRCxxxxxPCxxC結構域，該結構域是它們感受刺激并激活下游信號通路所必須的。亞細胞定位分析表明，這三個TLRs在鯉魚上皮細胞(EPC)中都定位于內質網上，這結果與它們在哺乳動物中的同源蛋

4、白相似。組織分布方面，它們在各種受試組織中都有表達，尤其在免疫相關組織中高表達，比如脾臟和腎臟。
　　 受病毒類似物poly(I∶C)刺激后，LycTLR7和LycTLR8的在大黃魚腎臟和脾臟組織中的表達水平都發(fā)生上調;細菌23S rRNA上的保守序列(')ACGGAAAGACCCCG'是小鼠TLR13的特異性配體，在受到它刺激后，LycTLR13在大黃魚腎細胞中的表達水平發(fā)生上調。
　　 值得一提的是，TLR13是一個