脂聯(lián)素在皖南花豬脂肪中的表達(dá)及對肌內(nèi)脂肪的影響.pdf

1、皖南花豬是優(yōu)良的安徽省地方豬種,其優(yōu)點主要在于肉質(zhì)好和繁育性能強。脂肪組織不僅是一個儲存脂肪組織。脂聯(lián)素(Adiponectin,Adp)是由脂肪組織分泌的細(xì)胞因子,到目前為止它是唯一伴隨脂肪變多而它的血液濃度卻是降低的細(xì)胞因子。本實驗通過分析腎周脂肪、皮下脂肪中脂聯(lián)素及其受體基因水平差異,旨在探討脂聯(lián)素和皖南花豬肉質(zhì)的內(nèi)在關(guān)系。研究重組脂聯(lián)素對肌內(nèi)脂肪細(xì)胞的作用,探討脂聯(lián)素對豬肉質(zhì)的影響和作用機(jī)制。
　　1、皖南花豬脂肪組織中脂

2、聯(lián)素及其受體基因的表達(dá)
　　從皖南花豬繁育中心挑選4頭皖南花豬試驗,常規(guī)條件下飼養(yǎng)。養(yǎng)至90d屠宰,屠宰前禁食12h,采集皮下脂肪組織和腎周脂肪組織,采用相對定量實時熒光PCR方法檢測中脂聯(lián)素(Adp)、脂聯(lián)素受體1(AdipoR1)、脂聯(lián)素受體2(AdipoR2)mRNA表達(dá)。結(jié)果顯示:
　　(1)Adp mRNA在皮下脂肪的表達(dá)顯著高于腎周脂肪(P<0.05);AdipoR1、AdipoR2mRNA在皮下脂肪的表達(dá)極顯著

3、(P<0.01)高于腎周脂肪。
　　(2)皖南花豬皮下脂肪Adp與AdipoR1、AdipoR2顯著相關(guān)(r=0.60,P<0.05;r=0.57,P<0.05);皖南花豬腎周脂肪Adp與AdipoR1、AdipoR2顯著相關(guān)(r=0.31,P<0.05;r=0.37,P<0.05)。
　　以上結(jié)果表明:表明脂肪組織表達(dá)Adp及其受體,皮下脂肪可能是Adp的主要來源;且是Adp調(diào)節(jié)的主要部位。
　　2、脂聯(lián)素對豬肌內(nèi)脂

4、肪細(xì)胞的影響及其機(jī)制
　　挑選5d皖南花豬背最長肌組織,分離出實驗所需的前體肌內(nèi)脂肪細(xì)胞,到細(xì)胞融合80％以上,傳代繼續(xù)培養(yǎng),用不同濃度重組脂聯(lián)素(recombinant adiponectin,rAdp)處理,通過油紅O染色法鑒定,MTT方法測定細(xì)胞活力;利用qRT-PCR方法測Adp、AdipoR2、AdipoR1、PPARα和AMPK mRNA的表達(dá)量。顯示,脂肪細(xì)胞活力在添加rAdp后有降低趨勢,2μg/ml作用24h到達(dá)

5、顯著差異水平(P<0.05);rAdp處理12h后,脂肪細(xì)胞AdipoR1和AdipoR2 mRNA表達(dá)水平顯著升高(P<0.05),AMPK mRNA表達(dá)量顯著下降(P<0.05),沒有劑量依賴性。用rAdp處理細(xì)胞48h,Adp mRNA表達(dá)量顯著下降(P<0.05),PPARαmRNA表達(dá)量顯著升高(P<0.05),劑量效應(yīng)不是很明顯;AMPK mRNA表達(dá)量在10μg/mLrAdp處理組顯著升高(P<0.05)。Coumpoun