北京油雞種公雞精液品質(zhì)相關(guān)候選基因的SNPs分析及轉(zhuǎn)錄研究.pdf

1、精液品質(zhì)是衡量種公雞繁殖能力的一個(gè)重要指標(biāo)，其優(yōu)劣直接影響種蛋受精率乃至后代的生產(chǎn)性能。對(duì)精液品質(zhì)的檢測(cè)，挑選優(yōu)秀種公雞用于生產(chǎn)是家禽生產(chǎn)的重要保證。本研究以北京油雞種公雞為試驗(yàn)材料，以BSG，SPEE1，SPATA4，SPAG6，P2X7，ANXA7基因?yàn)楹蜻x基因，分析候選基因的遺傳多態(tài)性與北京油雞精液品質(zhì)及性發(fā)育相關(guān)性狀的關(guān)聯(lián)性，同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法研究候選基因在高、中、低精液量試驗(yàn)組中睪丸組織mRNA表達(dá)量的差異，旨在為精

2、液品質(zhì)相關(guān)候選基因的篩選及分子標(biāo)記輔助選擇的應(yīng)用提供參考依據(jù)，為北京油雞繁殖力標(biāo)記輔助育種研究奠定基礎(chǔ)。
　　 選擇89只35周齡北京油雞種公雞，采用MALDI-TOF-MSSNP技術(shù)進(jìn)行基因分型，利用Phase軟件和Haploview軟件進(jìn)行單倍型分析，構(gòu)建線性模型，對(duì)單個(gè)位點(diǎn)、單倍型與精液品質(zhì)和性發(fā)育相關(guān)性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。在試驗(yàn)一基礎(chǔ)上，選用89只58周齡北京油雞公雞，根據(jù)精液量高低分組取睪丸組織，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法研

3、究候選基因在高、中、低精液量試驗(yàn)組中睪丸組織mRNA表達(dá)量的差異。主要研究結(jié)果如下:
　　 1、候選基因共篩選出16個(gè)SNPs位點(diǎn)，關(guān)聯(lián)分析單個(gè)位點(diǎn)研究發(fā)現(xiàn)，SPAG6基因C29756T和T23041C位點(diǎn)與精液量、精子活率和精子畸形率顯著相關(guān)(P＜0.05)，T23041C位點(diǎn)CC基因型是高精液量-高精子活率-低精子畸形率的優(yōu)勢(shì)基因型;SPATA4基因C3422A位點(diǎn)與精子畸形率、精子密度、精液PH值、體重及睪丸重顯著相關(guān)(P

4、＜0.05)，C3422A位點(diǎn)的AA基因型是高體重-高睪丸重的優(yōu)勢(shì)基因型，A3329C位點(diǎn)與睪丸重顯著相關(guān)(P＜0.05);BSG基因C4294T與雞冠重顯著相關(guān)(P＜0.05);SPEE1基因G3399A、C5699T位點(diǎn)與體重顯著相關(guān)(P＜0.05);P2X7基因A139G位點(diǎn)與精液量、精子畸形率、肉髯重顯著相關(guān)(P＜0.05)，A139G位點(diǎn)的AA基因型是高精液量-低精子畸形率的優(yōu)勢(shì)基因型，C4184T、A10579G位點(diǎn)與精子活

5、率顯著相關(guān)(P＜0.05);ANXA7基因G6862A位點(diǎn)與精子密度顯著相關(guān)(P＜0.05)，A13854T位點(diǎn)與精液量顯著相關(guān)(P＜0.05)，G14234A位點(diǎn)與雞冠重顯著相關(guān)(P＜0.05);
　　 2、關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，SPAG6基因不同單倍型組合與精液量、精子畸形率顯著相關(guān)(P＜0.05);H4H4單倍型組合精液量顯著高于H2H3和H3H3組(P＜0.05)，精子畸形率顯著低于H2H3和H3H3等組合(P＜0.05)。H4

6、H4單倍型組合是高精液量-高精子活力-高精子活率-低精子畸形率的優(yōu)勢(shì)基因型，H2H3單倍型組合是雞冠選育的有利單倍型組合。
　　 3、在睪丸組織中實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)發(fā)現(xiàn):BSG，SEPP1，SPATA4與ANXA7基因的睪丸組織mRNA表達(dá)量在低精組中顯著低于高精組和中精組(P＜0.05);而P2X7基因的mRNA表達(dá)量在高、中、低精組差異不顯著(P＞0.05);SPAG6基因的mRNA表達(dá)量在高精組中顯著高于中精組和低精