應(yīng)用原生質(zhì)體技術(shù)改良秦嶺鏈霉菌的研究.pdf

1、秦嶺鏈霉菌(Streptomyces qinlingensis sp．nov．)是西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)藥研究所從陜西秦嶺山區(qū)土壤中分離到的一新種放線菌，其發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)多種植物病原真菌和細(xì)菌具有強(qiáng)烈的抑制作用。秦嶺鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)物中含有多種抑菌活性成分，其中包括10種鏈絲菌秦類抗生素。為了提高其發(fā)酵液的生物活性和有效成分含量，本試驗(yàn)以原生質(zhì)體為材料對(duì)該秦嶺鏈霉菌進(jìn)行菌株改良，主要研究結(jié)果如下： 1.應(yīng)用原生質(zhì)體再生并結(jié)合物理化學(xué)誘變得到

2、了抗菌活性提高較大、穩(wěn)定性較好的秦嶺鏈霉菌的誘變菌株。生測結(jié)果表明：秦嶺鏈霉菌原生質(zhì)體再生菌株R-72、亞硝基胍誘變菌株NTG-1和熱誘變菌株H30-7對(duì)枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、金黃葡萄球菌、銅綠假單胞菌和大腸桿菌等5種病原細(xì)菌和小麥赤霉病菌、蘋果炭疽病菌、番茄灰霉病菌、棉枯萎病菌和玉米彎孢病菌等5種植物病原真菌的抗菌活性比出發(fā)菌株均有顯著提高，并且連續(xù)培養(yǎng)10代，其遺傳性狀均比較穩(wěn)定。其中，菌株H30-7對(duì)上述5種植物病原真菌的毒

3、力是出發(fā)菌株的3.16、1.39、1.16、1.87和1.34倍。經(jīng)鄰苯二甲醛(OPA)柱前衍生化HPLC分析，再生及誘變菌株R-72、NTG-1和H30-7的鏈絲菌素F的含量分別為0.42mg/mL、0.66 mg/mL和0.76 mg/mL，但是與出發(fā)菌株的鏈絲菌素F含量(0.82 mg/mL)相比均有所降低。 2.將秦嶺鏈霉菌原生質(zhì)體與鏈霉素產(chǎn)生菌Str2的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，得到一株抗菌活性有較大提高且遺傳穩(wěn)定性良好的菌株