鏈霉菌菌株A與哈茨木霉T-23原生質體融合技術系統(tǒng)構建及融合菌株鑒定.pdf

1、　　本文研究鏈霉菌菌株A與哈茨木霉T-23兩遠源菌株屬間原生質體融合，構建出最佳融合技術系統(tǒng)，確立了最佳篩選模型，并對所篩選出的融合菌株進行了初步的鑒定。結果如下： 首先對出發(fā)菌株原生質體制備和再生條件進行優(yōu)化，經多次重復試驗所得結果為原生質體融合時選擇適當出發(fā)菌株原生質體比例找到依據(jù)。鏈霉菌菌株A與哈茨木霉T-23屬于兩遠源菌株，各自融合條件差異較大。試驗中確立了原生質體融合的篩選模型。試驗對出發(fā)菌株原生質體的融合條件進行了篩

2、選。試驗根據(jù)已經建立的最佳融合技術系統(tǒng)及篩選模型，經遺傳穩(wěn)定性檢驗初步獲得16株融合菌株，選融合菌株中的兩株F1-16、F2-16作為初步鑒定對象。由于試驗條件有限，僅通過一些簡單而直觀的方法如菌落形態(tài)、融合菌株孢子形態(tài)、孢子大小，DNA含量、可溶性蛋白凝膠電泳等來對出發(fā)菌株及融合菌株的形態(tài)學和遺傳學方面特性進行初步分析鑒定。資料顯示，測定孢子體積及DNA含量可鑒定雜合二倍體，試驗對出發(fā)菌株及兩個融合菌株F1-16、F2-16孢子體積及

3、DNA含量進行了測定，結合顯微鏡檢孢子形態(tài)觀察結果，可以初步認為融合菌株F2-16為雜合二倍體，融合菌株F1-16為單倍重組體。通過可溶性蛋白凝膠電泳譜帶分析，融合菌株F1-16除了具有與出發(fā)菌株相同的譜帶外，還有明顯的獨有譜帶，進一步證明在融合分離過程中融合菌株F1-16發(fā)生了染色體片斷的交換或基因突變，產生了新組分的蛋白。對出發(fā)菌株及融合菌株的過氧化物酶同工酶電泳分析效果不理想，僅證明親本之一鏈霉菌菌株A的過氧化物酶同工酶含量較高，