宮頸癌生物治療宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班

1、2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,腫瘤生物治療,應用現(xiàn)代生物技術(shù)及其產(chǎn)品進行腫瘤防治的新療法，它通過調(diào)動宿主的天然防衛(wèi)機制或給予天然（或基因工程）產(chǎn)生的針對性靶向性很強的物質(zhì)來取得抗腫瘤的效應。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,包括,免疫治療基因治療其他生物治療,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,免疫治療的方法,一。主動免疫 特異性免疫治療 非特異性免

2、疫治療二。被動免疫治療三。過繼免疫治療,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,非特異性免疫治療,生物免疫刺激劑：BCG、短棒狀桿菌、OK432化學免疫刺激劑：左旋咪唑、西咪替丁、活化巨噬細胞的溶解物化學治療藥物：環(huán)磷酰胺、長春新堿、順鉑免疫調(diào)節(jié)藥物：靈芝多糖、自然飲等細胞因子：干擾素、IL-2、TNF,免疫治療方法,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,,特異性免疫治療是一種調(diào)動

3、宿主自身抗腫瘤免疫應答的方法。包括各種疫苗的治療如腫瘤疫苗、多肽疫苗、病毒疫苗、蛋白疫苗、DC疫苗等,免疫治療的方法,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,被動免疫治療,直接輸入外源性活性物質(zhì)抗腫瘤作用方法單克隆抗體治療細胞因子治療,免疫治療方法,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,過繼免疫治療,過繼性免疫治療是指將有免疫活性的自體或同種異體的免疫細胞或細胞因子輸給患者，以提高患者

4、的免疫功能。方法：克隆化CTLLAK細胞腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）樹突狀細胞（DC）細胞因子介導殺傷細胞（CIK）,免疫治療方法,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,克隆化CTL,分離外周血單核細胞，加入IL-2培養(yǎng)，自體腫瘤細胞刺激 建立腫瘤特異性CTL克隆，擴增回輸難度大，難以推廣,,免疫治療方法,,2005－04－11

5、,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,LAK細胞,分離患者外周血淋巴細胞，IL-2激活、擴增，回輸給患者有廣譜的抗瘤性，可殺傷同基因型、同種異體腫瘤細胞在黑色素瘤、腎癌的治療 有效率20％，尤其在消除胸腹水及改善自覺癥狀效果明顯,免疫治療方法,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）,從腫瘤組織中分離出淋巴細胞，以IL-2激活、擴增，回輸給患者TIL的殺傷活性較LAK細胞強，抗瘤譜窄

6、，臨床應用的效果比LAK稍好。操作極為復雜，難以得到足夠的可用于治療的細胞數(shù)量，對轉(zhuǎn)移腫瘤不一定有效,免疫治療方法,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,樹突狀細胞（Dendritic cells,DC ）,DC是機體免疫反應的始動者，在免疫應答的中具有獨特的地位,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,樹突狀細胞（DC）,1.形態(tài)特點2.來源、生長發(fā)育和功能特點,3.在免疫學中的地位,200

7、5－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,DC的功能特點,非成熟階段非常強的抗原攝取和加工能力成熟階段非常強的抗原提呈能力至今發(fā)現(xiàn)最強的專職抗原提呈細胞特別之處：唯一的能在體外激活初始型T淋巴細胞,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,DC過繼治療的方法,1.分離前體細胞、培養(yǎng)2.抗原沖擊致敏DC3.回輸或免疫接種,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,利用DC治療腫瘤的

8、研究,Zitvogel 治愈了1cm3接種腫瘤的小鼠 B淋巴瘤治療前列腺癌治療 黑色素瘤治療,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,細胞因子誘導殺傷細胞（CIK）,應用多種細胞因子刺激，從外周血淋巴細胞中誘導、擴增出以CD3+CD56+、CD3+CD8+為主的異質(zhì)細胞群。具有NK細胞的某些特點，非MHC依賴性方法以IL-2 、CD3單抗、TNF-α等刺激淋巴細胞增殖致敏的DC與淋巴細胞混合，刺激抗腫瘤

9、CTL增殖淋巴細胞回輸,免疫治療方法,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,單克隆抗體治療,“生物導彈”抗體 雙特異性抗體信號抗體抗獨特型抗體,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,“生物導彈”抗體,抗體的一端連接核素、毒素、化療藥物，利用抗原抗體特異性結(jié)合的特性，使藥物直接在腫瘤細胞中起作用。意義：效率大大提高負反應降低,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學

10、習班,生物導彈特點和局限性,生物導彈利用單克隆抗體導向，藥物、毒素、同位素則發(fā)揮高效的殺傷腫瘤的作用，因而，療效大大提高。局限性交叉反應對正常組織也有損害、使用鼠源性單抗導致抗抗體影響繼續(xù)使用效果，甚至過敏反應、腫瘤表面抗原的調(diào)變減少與抗體結(jié)合。,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,雙特異性抗體（BsMab）,抗體的兩個Fab段能同時與兩個不同的抗原結(jié)合。雙特異性抗體一臂結(jié)合腫瘤抗原，一臂結(jié)合免疫效應細

11、胞。抗體充當橋梁作用。結(jié)合效應細胞的分子：巨噬細胞FcγR1 NK細胞的CD56和CD16 中性粒細胞FcγRII T細胞CD3、CD28、CD2,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,信號抗體（signaling antibody）,單抗通過交聯(lián)或封閉腫瘤細胞表面膜受體產(chǎn)生跨膜信號，直接影響或控制腫瘤的生長，導致腫瘤細胞凋亡。抗體相當于受體結(jié)合配體的代替物，模擬或調(diào)整信號活性。這種抗體又稱為信

12、號抗體，并能致敏腫瘤細胞，使其對傳統(tǒng)的DNA損傷藥物的敏感性增強。,免疫治療方法,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,針對酪氨酸激酶受體的單抗、小分子,單抗類分子靶向藥物常用的有Herceptin(賀賽汀)Rituximab(美羅華)IMC-C225 (Erbitux)Avastin小分子化合物常用的有：Glivec(STI571, 格列衛(wèi))ZD1839(Iressa)OSI774 (Tarceva

13、),98年 FDA批準上市 用于HER2受體＋的乳腺癌,2003年 FDA 批準上市 用于 NSCLC 第三線單藥治療,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,抗獨特性抗體,根據(jù)免疫網(wǎng)絡理論，機體產(chǎn)生的抗體的某些空間結(jié)構(gòu)可能成為另一抗體的識別、結(jié)合位點。識別第一抗體的抗原抗體結(jié)合部位的第二抗體則與最初的抗原具有空間結(jié)構(gòu)類似的特點。第二抗體可以代替抗原誘發(fā)免疫反應。,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新

14、進展學習班,獨特型網(wǎng)絡調(diào)節(jié),① Ig分子上兼有抗原結(jié)合特性和抗原決定簇功能的部位稱為獨特型，抗體的獨特型可被體內(nèi)某些具有相應抗原決定簇識別受體的細胞識別，從而產(chǎn)生抗獨特型抗體.進一步形成獨特型網(wǎng)絡 ② 獨特型網(wǎng)絡的細胞：ARC；內(nèi)影象組；抗獨特型組；非特異平行組,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,宮頸癌的免疫治療,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,子宮頸癌疫苗,人乳頭瘤病毒 HPV 與子

15、宮頸癌的關(guān)系早已得到證實超過20 種的預防性或治療性抗 HPV 疫苗正在進行臨床或臨床前試驗。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,,以 HPV疫苗為代表的特異性免疫治療結(jié)合細胞因子等非特異性免疫治療可能對子宮頸癌的預后產(chǎn)生重大 改 善 ； 而 預 防 性 疫 苗 對 抗HPV 感染的保護作用，將會有效的降低子宮頸癌的患病幾率。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,以 HPV為基礎(chǔ)的疫苗

16、,研究發(fā)現(xiàn)在90%左右子 宮 頸 癌 患 者 中 可 檢 測 到 HPV， 尤 其 是 HPV16、18、31、33、45、58 型為子宮頸癌的高危型?，F(xiàn)已明確，HPV 早期蛋白中的E6和 E7, 主要與病毒細胞轉(zhuǎn)化功能及致癌性有關(guān)；而晚期蛋白 L1 和L2 分別為HPV的種特異性抗原和型特異性抗原。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,,由于目前已經(jīng)鑒定的HPV有 100 多型，且培養(yǎng)困難，并具有潛在的致癌性，

17、因此HPV 減毒活疫苗或死疫苗暫時不適合用于臨床。當前研究的策略主要是針對高危型 HPV E6、E7, 特異性靶位構(gòu)建治療性疫苗和利用L1、L2 病毒結(jié)構(gòu)蛋白研究預防性疫苗。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,治療性疫苗：,主要有 HPV 多肽疫苗HPV 載體疫苗融合蛋白疫苗和嵌合疫苗,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,HPV多肽疫苗,目前已經(jīng)確認有 3個由 HPV16 E7 編

18、碼的多肽具有免疫原性。這些多肽在離體及體內(nèi)條件下均能激發(fā)細胞毒性T淋巴細胞(CTL) 反應，從而對腫瘤細胞起殺傷作用。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,HPV多肽疫苗的臨床試驗（1）,Van Drriel等 I期臨床試驗應用 HPV E7 多肽和 pan-DR 輔助多肽的復合疫苗免疫19例晚期子宮頸癌患者，未發(fā)生明顯副反應，其中 2例病變在 1年內(nèi)維持靜止狀態(tài)，15 例進行性惡化，另 2例經(jīng)隨后的

19、輔助化療而腫瘤消退,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,,這一結(jié)果提示 HPV16 E7 多肽疫苗治療是有效的，尤其對終末期患者仍有一定療效 。 HPV E7 多 肽 僅 對HLA-A2 具有高親和性，受此HLA組織型的 限制，該疫苗僅能對有限的患者起作用。免疫治療和化療應該有機的結(jié)合使用,Van Drriel等 I期臨床試驗,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,HPV多肽疫苗的

20、臨床試驗（2）,Stelar 等研究兩次 HPV16 E7脂肽疫苗接種后7例患者中 5例發(fā)生特異的 CTL反應。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,HPV 多肽疫苗的臨床試驗（3）,美國食品與藥品管理局 （FDA.）已批準用HPV 16 E7脂肽疫苗進行臨床期試驗，隨訪情況良好，但其最佳免疫途徑、免疫劑量等問題尚需進一步研究。,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,HPV 載體疫苗,將編

21、碼病毒蛋白的基因重組到機體細胞中，由機體細胞合成病毒蛋白后表達在細胞表面，再引發(fā)一系列的免疫應答反應。根據(jù)這一原理，通過腺相關(guān)病毒 AAV 將 HPV E6 和E7 抗原基因轉(zhuǎn)染到DC中，可以有效提高抗原的呈遞，以激活 CTL的殺傷作用。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,臨床前試驗,Liu和Chiriva-Internati等腺相關(guān)病毒（AAV）分別轉(zhuǎn)染 HPV16 E6 和 E7至 DC，結(jié)果顯示.AA

22、V 可以將載體染色體整合入細胞，從而激活 DC，進一步觸發(fā)顯著的殺傷反應。AAV可能可以進行臨床試驗但是目前的研究顯示，盡管 AAV可以提高抗原呈遞效果，其效率仍不能讓人滿意。,HPV載體疫苗,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,融合蛋白疫苗和嵌合疫苗（1）,Adams 等 I期臨床試驗將HPV 嵌合基因治療8 例晚期子宮頸癌患者結(jié)果所有患者體內(nèi)均產(chǎn)生抗疫苗的IgG抗體，其中 3 例產(chǎn)生

23、特異性抗 HPV 抗體，免疫9周后可檢測到 HPV特異性的 CTL，但在 14和 20周消失；2例在注射疫苗 15和21 周臨床隨訪時，狀態(tài)良好。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,融合蛋白疫苗和嵌合疫苗（2）,Lin 等 I期臨床試驗將 E7和溶酶體相關(guān)的膜蛋白基因融合，構(gòu)形嵌合基因 E7/LAMP-1 重組病毒疫苗結(jié)果顯示，可以增強 CD8+ T細胞的抗原呈遞 ， 提 高 疫 苗 的 抗 腫

24、 瘤 反 應 。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,融合蛋白疫苗合嵌合疫苗（3）,Chen 等 I期臨床試驗用 E7/LAMP-1 重組病毒疫苗進行研究，也發(fā)現(xiàn)該疫苗可以產(chǎn)生強烈的E7特異性 C8+ T細胞反應。,,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,樹突狀細胞疫苗,Santin等 發(fā)表于Lancet雜志 2002年用HPV18 E7蛋白＋DC疫苗對 1例 27歲放、化療

25、抵抗且廣泛轉(zhuǎn)移的子宮頸癌復發(fā)患者進行免疫治療，結(jié)果雙肺病灶消退，病人生活質(zhì)量明顯改善。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,目前正在進行臨床試驗,1。Phase II Pilot Study of Clinical Activity and Proteomic Pathway Profiling of the EGFR Inhibitor, ZD1839 (Iressa; Gefitinib), In Patien

26、ts With Epithelial Ovarian Cancer Or Cervical Cancer 2。Phase II Adjuvant Study of the Recombinant Vaccinia Virus Vaccine Expressing the Human Papilloma Virus 16, 18, E6 and E7 in Early Cervical Cancer 3。Phase II Study

27、of Whole Body Hyperthermia Combined With Doxorubicin HCl Liposome and Fluorouracil in Patients With Metastatic Breast, Ovarian, Endometrial, or Cervical Cancer 4。Study of MN Protein Expression as a Potential Diagnostic

28、Biomarker of Cervical Dysplasia and/or Neoplasia in Patients With Atypical Glandular Cells of Undetermined Significance,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,,5。Phase II Study of SGN-00101 Immunotherapy in Patients With Grade III

29、 Cervical Intraepithelial Neoplasia 6。Phase II Randomized Study of SGN-00101 Vaccine in Human Papillomavirus-16-Positive Patients With Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance or Low-Grade Squamous Intraepit

30、helial Lesions of the Cervix 6。Phase II Study of Cetuximab and Cisplatin in Patients With Advanced, Persistent, or Recurrent Carcinoma of the Cervix 7。Cetuximab, Cisplatin, and Radiation Therapy in Treating Patients Wi

31、th Stage IB, Stage II, Stage III, or Stage IVA Cervical Cancer,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,預防性疫苗,HPV晚期區(qū) (L) 編碼主要衣殼蛋白 L1和次要衣殼蛋白L2，其中 L1 為糖蛋白，結(jié)構(gòu)保守，是主要的種特異性抗原，L2為核蛋白，是型特異性抗原，起組蛋白作用。研究發(fā)現(xiàn) L1主要結(jié)構(gòu)病毒蛋白能自我組裝成病毒樣顆粒 (VLPs)，可以產(chǎn)生高

32、水平的中和抗體。因而可利用重組 L1 和 L2亞單位病毒結(jié)構(gòu)蛋白，自我裝配成病毒樣顆粒用于預HPV感染。,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,宮頸癌的防性疫苗,2個重要的試驗2002年 Merck 公司的 HPV16 L1 單價疫苗2004年 葛蘭素史克公司的 HPV16/18 L1 雙價疫苗,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,Merck 公司的 HPV16 L1 單價疫苗,III期隨機

33、對照試驗2392例 （16－23歲），宮頸HPV16DNA(-)/血清HPV(-) HPV16 VLPs疫苗 安慰劑持續(xù)性感染 0 3.8% CIN 0 9例,N Engl J Med 2002;347:1645-51.,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研

34、究新進展學習班,2價HPV16/18 L1 VLPs 疫苗,生產(chǎn)商葛蘭素史克 2價HPV16/18 L1 VLPs 疫苗（AS04）北美和巴西1113例15－25歲血清學HPV陰性婦女中進行3次免疫接種。經(jīng)過27個月隨訪，發(fā)現(xiàn)疫苗的有效率為：對一過性感染保護率91.6%,持續(xù)性感染保護率100％，異常細胞學92.9%,Lancet. 2004 Nov 13;364(9447):1757-65.,2005－04－11,宮

35、頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,總結(jié),現(xiàn)代免疫治療有非常光明的前途不久的將來成為婦科惡性腫瘤臨床治療的一種不可缺少的輔助手段臨床治療應該清楚免疫治療的地位與三大常規(guī)治療有機結(jié)合多種免疫方法結(jié)合,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,基因治療,概念針對腫瘤發(fā)生的遺傳學背景，將外源性目的基因引入腫瘤細胞或其他體細胞內(nèi)以糾正過度活化或補償缺陷的基因，從而達到治療腫瘤的目的，即為腫瘤的基因治療。,2005－04－

36、11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,主要途徑,抑癌基因治療癌基因治療免疫基因治療自殺基因治療多藥耐藥基因治療腫瘤血管基因治療,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,常用的自殺基因,1。單純皰疹病毒胸苷激酶基因(Herpes simplex virus-thymidine kinase, HSV-tk)2。水痘帶狀皰疹病毒胸苷激酶基因(Varicella-zoster virus-thymidine

37、, VZV-tk)3。大腸桿菌胞嘧啶脫氨酶基因(E. coli-cytosine deaminase, CD)3。細胞色素P-450基因4。大腸桿菌黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶基因(Glunaine phosphoribosyl transfeRase, GPT),2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,常用的耐藥基因,1。MDR-1(Multidrug resistance 1)gene2。DHFR(

38、Dihydrofolate reductase)的變異體3。MGMT(O6-methylguanine-DNA methyltransferase) gene,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,基因治療存在的問題,（1）外源基因的表達效率問題（2）外源基因表達調(diào)控問題（3）在處理多系統(tǒng)基因紊亂過程中基因治療的作用遠未闡明（4）潛在的風險,2005－04－11,宮頸癌規(guī)范化治療和研究新進展學習班,生