黑豆與黃豆大豆甙元的 hplc 測(cè)定方法研究

1、黑豆與黃豆大豆甙元的HPLC測(cè)定方法研究摘要：采用高效液相色譜法（HPLC），能夠快速、有效建立檢測(cè)黑豆、黃豆的大豆甙元成分的檢測(cè)方法。結(jié)果：HPLC法可以有效的分理出黑豆以及黃豆的大豆甙元，在色譜條件等不變的情況下，甲醇：水：乙酸=42：57：1的流動(dòng)對(duì)于分離兩者的效果都較好，獲得的圖譜十分清晰，測(cè)定的成分峰形以及保留時(shí)間較為滿意。HPLC法能夠同時(shí)檢測(cè)出黃豆和黑豆提取物異黃酮中的大豆甙元含量，方法簡(jiǎn)單、快速，精密度高且重現(xiàn)性能好。關(guān)

2、鍵詞：大豆甙元HPLC黑豆與黃豆大豆甙元又名大豆素；黃豆苷元；大豆黃酮；4，7二羥基異黃酮大豆甙元隸屬于黃酮類化合物，是異黃酮的一種，也是植物雌激素的一種。它可以從植物中提取，具有雌激素功能，是非甾類化合物[1]。研究表明大豆甙元不溶于水，呈固態(tài)，應(yīng)用高效的檢測(cè)方法是研發(fā)大豆甙元的技術(shù)基礎(chǔ)，高效液相色譜法（HPLC）作為一種先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)，就能夠十分有效的檢測(cè)出大豆甙元。1、材料與方法1.1黑豆、黃豆樣品選取小黑豆，吉林32、吉林35；

3、吉黃豆1號(hào)，吉黃豆2號(hào)，平安8、吉林47、GR8836，隨機(jī)挑選60粒種子均勻粉碎，40日后稱取100mg的粉樣，加入4ml80%甲醇，常溫下靜置2.5h，80℃水浴14小時(shí)，對(duì)12000g的物質(zhì)離心15min，對(duì)預(yù)處理液用濾膜進(jìn)行過濾，1.5.2大豆甙元活性成分檢測(cè)精密稱取大豆及黑豆乙醇提取物1.5g，加30ml80%的乙醇，離心20min，微孔濾膜過濾，制備供測(cè)樣品液。以標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的分離測(cè)定方法進(jìn)行研究分析，計(jì)算樣品中大豆甙元的含

4、量。2、結(jié)果2.1流動(dòng)相選擇結(jié)果分別選取A甲醇：0.4%磷酸=55：45；B含5%乙酸和25%甲醇水溶液；C甲醇：水：乙酸=42：57：1；D0.05%磷酸和乙睛梯度洗脫。4種流動(dòng)相進(jìn)行分離檢測(cè)出的黃豆、黑豆醇提取物中的大豆大豆甙元，詳細(xì)結(jié)果見表1。結(jié)果表明在色譜條件等不變的情況下，甲醇：水：乙酸=42：57：1的流動(dòng)對(duì)于分離兩者的效果都較好，各個(gè)組分的分離度都不錯(cuò)，所以確定甲醇：水：乙酸=42：57：1為流動(dòng)相進(jìn)行的樣品分析。2.2標(biāo)

5、準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系分析色譜條件同樣不便，精密吸取10ul不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品液，測(cè)定大豆甙元的吸收峰面積，測(cè)定結(jié)果見表2.將吸收峰面積作為Y軸和組分濃度作為X軸進(jìn)行線性回歸分析，得到的黃豆大豆甙元和黑豆大豆甙元回歸方程分別為：Y=2.49107X6.8105r=0.894039765；Y=2.55107X7.5105r=0.995034708.線性范圍分別是，黃豆大豆甙元0ugmL～350ugmL、0ugmL～270ugmL.3、討論本組