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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文H.pylori 23S rRNA基因突變的檢測(cè)方法與評(píng)價(jià)姓名:任英霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:崔東來(lái)20050301中 文 摘 要研 究報(bào) 道H . p y l o r i 對(duì)克拉 霉 素耐 藥的 產(chǎn) 生是因 為 2 3 S r R N A基因的點(diǎn)突變, 該突變分別產(chǎn)生了B s a l , B b s l 新的酶切位點(diǎn)。本研究旨 在建立一種巢式 P C R 的方法, 從胃 粘膜和糞便中直接提取
2、H . p y l o r i 的D N A , 擴(kuò)增其2 3 S r R N A的 · 個(gè)片段,檢測(cè) A 2 1 4 3 G , A 2 1 4 2 G 基因突變,預(yù)測(cè)克拉霉索耐藥的} h h況 。第 一部分 胃 粘膜 H . p y I o r i 2 3 S r R N A 基因突 變檢測(cè)方法的建立與評(píng)價(jià)目 的 : 建立 巢式P C R方 法 檢 測(cè)胃 粘 膜中H . p y l o r i 的 感 染及
3、其2 3 S r R N A基因突變情況。方法: 采集2 0 0 3 年 1 2 月至2 0 0 4 年7 月行胃 鏡檢查的 5 7例患者的胃 粘膜,3 8 例男性,平均年齡4 4 歲, 其「 卜 包括3 0例 慢性胃 炎、 2 1 例消 化 性潰 瘍 和6 例胃 癌患 者。 H . p y l o r i 的 診斷 依 據(jù)快 速 尿素 酶 試驗(yàn)、 組 織 學(xué) 檢查 及 I t 呼氣試 驗(yàn), 此三項(xiàng)中兩項(xiàng)陽(yáng) 性為 H . p y l
4、o r i 陽(yáng)性患者,兩項(xiàng)陰性為 H . p y l o r i 陰 性患 者。 5 7 例患 者 ( 4 2 例H . p y l o r i 陽(yáng) 性,1 5 例 H . p y l o r i陰性) 的胃粘膜提取D N A , 均經(jīng)過(guò)熒光定量P C R 和巢式P C R兩 種 方法 擴(kuò)增 , 巢式P C R 產(chǎn)物 經(jīng)B s a l 和 B b s l 進(jìn)行 酶切。 采用 S P S S 1 2 . 0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分 析,兩種方法
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