2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、花生四烯酸(arachidonic acid,簡稱AA或ARA)在人體許多生理過程中起重要作用。作為一種重要的功能性油脂,在食品、藥品、保健品和化妝品等領(lǐng)域的需求正逐步增長,市場前景繼續(xù)呈擴大趨勢。利用高山被孢霉(Mortierellaalpina)發(fā)酵生產(chǎn)ARA因其ARA含量高、油脂組成合理等特點一直作為工業(yè)生產(chǎn)的主要方式。M.alpina是《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品營養(yǎng)強化劑使用標(biāo)準(zhǔn)》(GB14880-2012)中生產(chǎn)ARA的指定菌種,

2、對其菌種進(jìn)行選育是提高ARA產(chǎn)量與品質(zhì)的關(guān)鍵因素之一。
  M.alpina的油脂組成直接影響到產(chǎn)品質(zhì)量,在實際生產(chǎn)過程中發(fā)現(xiàn)當(dāng)二十四碳烷酸(24C,木蠟酸)在總油脂中含量超過8%時,終產(chǎn)品油脂在低溫冷藏時析出白色沉淀物。因此,本課題利用自然雜交的育種方法對低24C菌種進(jìn)行了篩選。將24C及ARA含量均較低的一株野生菌YS-88447與生產(chǎn)用菌株G5進(jìn)行自然雜交育種,篩選獲得一株ZJ-3菌株,其24C含量為3.39%,對比生產(chǎn)菌株

3、(24C含量為9.16%)降低了170%;其ARA產(chǎn)量為5.21 g/L,對比生產(chǎn)菌株(ARA含量為4.86 g/L)提高了6.72%。
  本課題探索并建立了Fe2+與磁場共同作用誘變M.alpina的方法,對G5進(jìn)行誘變后篩選得到一株油脂含量達(dá)44.85%的高產(chǎn)菌株C16,其ARA產(chǎn)量為6.43g/L,24C含量為8.98%。
  為快速獲得高油脂含量、低24C的ARA高產(chǎn)菌株,加速育種過程,本課題利用原生質(zhì)體融合技術(shù)定

4、向篩選優(yōu)良性狀相結(jié)合的菌株。將上述獲得的優(yōu)良性狀菌株Z J-3和C16進(jìn)行原生質(zhì)體融合,對原生質(zhì)體制備及再生過程中相關(guān)因素進(jìn)行研究,確定了最佳條件。為提高融合子篩選效率和準(zhǔn)確率,本課題首次嘗試使用流式細(xì)胞分選法并結(jié)合雙滅活兩種方法取得了良好的效果。經(jīng)過對融合子再生及發(fā)酵培養(yǎng),篩選獲得菌株YR-2,其油脂含量達(dá)43.18%,24C含量為3.26%,ARA產(chǎn)量達(dá)6.32 g/L,并具有良好的遺傳穩(wěn)定性,達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。本研究為高山被孢霉菌種選

5、育提供了新思路,可促進(jìn)ARA生產(chǎn)的產(chǎn)能升級與產(chǎn)品品質(zhì)提升。
  一直以來,M.alpina研究及發(fā)酵生產(chǎn)所用氮源原料均為天然培養(yǎng)基(含酵母粉),其成分復(fù)雜、不同批次易存在較大差異,不利于精細(xì)實驗分析以及工業(yè)生產(chǎn)的穩(wěn)定。因此,使用無機氮源對其進(jìn)行替換實現(xiàn)全合成培養(yǎng)基發(fā)酵具有現(xiàn)實意義。本課題通過分類及單因素缺失實驗確定了氨基酸混合物、無機鹽以及生長因子的添加量,初步確定了M.alpina全合成培養(yǎng)基成分。雖目前獲得的ARA產(chǎn)量為天然培

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