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1、河北大學碩士學位論文枯草芽孢桿菌NCD2解磷相關(guān)基因的克隆及抑菌物質(zhì)的分離鑒定姓名：李晶申請學位級別：碩士專業(yè)：植物學指導教師：馬平20090501AbstractAbstractBacillussubtilisstrainNCD。2wasisolatedfromtherhizosphereofcottonandshowedantagonismtoVerticilliumdahliaebysecretingantifungalactiv
2、ecompoundsT11isstrainalsoshowedlecithin—solubilizingabilityPlasmidpHV1249whichcarryingtransposonmini—TnJDWastransferredintostrainNCD2byelectrotransformation，andthetransposonlibraryofNCD2WasconstructedThreemutantswitlldef
3、ectiveoflecithinsolubilizingabilitywereselectedfrommorethan3000miniTnlOinsertedmutantsSouthernhybridization、加t11miniTnlOfragmentasaprobeshowedthatallthesemutantscontainedsinglecopytransposoninsertion，whichpossiblylocaliz
4、edatthesamechromosomallocationOnemutantM216WasusedforfurtherstudyTheflankingsequenceofinsertionsiteWasclonedfrommutantM216byNestPCRSequenceanalysisshowedthattheinsertedgenehasof98％identitywithphoRinBsubtilisstrain168Gene
5、ticcomplementationWasconductedbycloningphoRgeneintoplasmidpHY300PLKandtherecombinantplasmidwastransferredintomutantM216ThelecithinsolubilizingabilityofmutantM216wasrestoredResultssuggestedthatthelecithin—solubilizingabil
6、ityofNCD一2wasrelatedwithphoRgenePurificationandidentificationofantifungallipopeptidesproducedby丑subtil&NCD2WasalsostudiedinthisexperimentCrudelipopeptideswereextracted、析mmethanolfromtheprecipitate，whichWasobtainedbyaddin
7、g6mol／LHCltothecellfreeculturebrothandthenstoredat4“CovernightThecrudeextractshowedantifungaiactivitiesagainst礦dahliaeandBotrytiscinereaonthedoublelayermediumThreemainlypeakgroupswereobtainedbyHPLCanalysis，andonlytheseco
8、ndcompoundhadinhibitoryactivityagainst礦dahliaeandBcinereaThesecondcompoundWasanalysisedbyMALDITOFMSandtwogroupsofhomologues、析t11adifferenceof14DainmolecularweightswereidemifiedInthefirstgroup，therewere4kindsofhomologuesw
9、iththemolecularweightsof1446801，1460813，1474830，1488852Darespectively，whichwereestimatedastheisomerofFengycinA(Cls—ig)Inthesecondgroup，themolecularweightsof5kindsofhomologueswere1462798，1476817，1490839，1504855，1518867Dar
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