以八羥基喹啉衍生物為配體的亞硝酰釕配合物的合成及其生物活性研究.pdf

1、NO在哺乳動物中是至關重要的介質之一，它在對細胞和器官功能的調控中充當著重要的角色，NO在生物體系中的的重要性引起了科學家對體內釋放NO試劑的關注，這些試劑可能是在熱或光的激發(fā)下釋放NO的，隨后NO被運送到目標細胞或器官。結合NO的金屬配合物不僅在配位化學而且在生物化學和藥理學等領域的重要應用也受到了廣泛的關注。NO能結合多種類型的中心金屬離子，從而形成具有不同結構、配位數(shù)和電子性質的的亞硝酰配合物?；谶@些發(fā)現(xiàn)，許多過渡金屬的亞硝酰配

2、合物作為潛在的NO載體而被廣泛的研究，它們能在光照射時在生物組織中釋放并傳遞NO。亞硝酰釕配合物被認為是潛在的NO轉運試劑，這是由于它們的熱穩(wěn)定性能以及在光刺激條件下能釋放NO的特殊性質。目前，尋找有效的外源性NO供體、定向地將NO供體運輸?shù)讲∽儾课灰约癗O在特定部位的定時定量釋放是目前科學研究的熱點。
　　本文中，合成了[(CH3)4N][RuCl3(2mqn)(NO)]、[(CH3)4N][RuCl3(2cqn)(NO)]、[

3、(CH3)4N][RuCl3(qn)(NO)]三種配合物,配體分別是H2mqn、H2cqn以及qn；并用1H NMR技術、IR技術以及UV光譜對其進行表征，比較了它們的理化性質；利用NO選擇性電極法測定了光激發(fā)條件下配合物釋放NO的量，初步獲得了光調控配合物釋放NO的方法；研究了DNA-EB熒光光譜在加入三種亞硝酰釕配合物后的變化情況，并采用靜態(tài)淬滅法簡單分析了它們之間結合的機制、結合常數(shù)以及結合位點數(shù)，通過比較結合常數(shù)的大小確定了三種

4、配合物與 DNA的結合強弱順序是：[RuCl3(2cqn)(NO)]->[RuCl3(2mqn)(NO)]->[RuCl3(qn)(NO)]-；利用瓊脂糖凝膠電泳法研究了光照條件下DNA的電泳條帶在加入三種亞硝酰釕配合物后的變化；通過研究HSA的熒光光譜、紫外光譜以及同步熒光光譜在加入三種配合物后的變化情況來判斷它們之間相互結合的方式；探究三種配合物對腫瘤細胞活性的影響。
　　本文主要研究內容主要包括六個部分：
　　第一：主

5、要介紹了NO的生理功能以及常見的外源性NO供體，光動力療法的研究進展。
　　第二：在Ru(NO)Cl3(H2O)2配合物的基礎上，分別合成了以H2mqn、H2cqn和qn為配體的三種亞硝酰釕配合物[(CH3)4N][RuCl3(2mqn)(NO)]、[(CH3)4N][RuCl3(2cqn)(NO)]、[(CH3)4N][RuCl3(qn)(NO)]，并用紅外光譜檢測了配合物的特征官能團的振動峰位置；利用1H NMR技術測定了每種

6、亞硝酰釕配合物中包含的各類氫原子的化學位移值以及個數(shù)；測定了三種亞硝酰釕配合物的紫外吸收光譜圖，確定了各特征吸收峰的位置，并對每一個吸收峰進行歸屬。
　　第三：使用TBR-4100自由基分析儀首先檢測了不光照條件下，三種亞硝酰釕配合物在溶液中釋放NO的情況，接著使用光源照射樣品，實時定量的檢測溶液中的電流信號值，結果表明配合物釋放NO的量隨光照時間的延長而逐漸增加。
　　第四：通過觀察DNA-EB熒光光譜在加入配合物后的變化

7、情況來確定它們之間的結合方式，接著采用靜態(tài)淬滅法分析并計算它們之間結合常數(shù)的大小，最終得出三種配合物與DNA結合的強弱順序是：RuCl3(2cqn)(NO)]->[RuCl3(2mqn)(NO)]->[RuCl3(qn)(NO)]-。通過研究不光照和光照條件下，三種亞硝酰釕配合物的加入對質粒pBR322 DNA的電泳條帶的影響來確定配合物對DNA的光剪切作用，采用的方法是瓊脂糖凝膠電泳法，結果表明在黑暗條件下配合物對DNA幾乎沒有表現(xiàn)出

8、剪切活性，DNA都以超螺旋形式存在，而在光照條件下配合物卻表現(xiàn)出很好的光剪切作用。
　　第五：通過觀察HSA的熒光光譜在加入三種亞硝酰釕配合物之后的淬滅情況，確定了配合物與HSA之間發(fā)生了結合作用，并采用靜態(tài)淬滅法進行分析，最后通過比較結合常數(shù)的大小判斷了三種配合物與 HSA結合的強弱順序為：[RuCl3(2cqn)(NO)]->[RuCl3(2mqn)(NO)]->[RuCl3(qn)(NO)]-；利用紫外光譜法對上述結論進一步

9、檢驗；通過研究HSA的同步熒光光譜在加入配合物之后的淬滅情況來判斷它們之間的作用機理，結果表明金屬釕配合物會影響HSA中的酪氨酸和色氨酸殘基的疏水環(huán)境并引起HSA構象的變化。
　　第六：利用MTT法探究了不光照和光照條件下，三種亞硝酰釕配合物對腫瘤細胞MCF-7和HepG-2活性的抑制作用，通過計算IC50值，確定了各配合物對腫瘤細胞的毒性大小為：[RuCl3(2cqn)(NO)]->[RuCl3(2mqn)(NO)]->[RuC