特異性鈉通道調制劑致傷害性的脊髓上位中樞機制研究.pdf

1、蝎蟄會產(chǎn)生強烈的疼痛感，并伴隨強烈的炎癥反應。東亞鉗蝎(BmK)廣泛分布在我國淮河以北。長期以來，人們對于蝎蟄后產(chǎn)生一系列痛相關反應的機制尚不十分清楚，仍有很多問題有待研究。
　　 為了更好地研究這種傷害性現(xiàn)象，也為更好地模擬相關的臨床痛覺病征，為臨床研究提供穩(wěn)定載體，該實驗室成功地建立了大鼠實驗性蝎蟄痛模型用于模擬蝎蟄后的各種癥狀。前期研究工作表明，東亞鉗蝎粗毒可劑量依賴性地誘發(fā)大鼠自發(fā)痛行為長達2小時、熱痛敏反應持續(xù)大約1周

2、、機械痛敏行為持續(xù)超過3周以及持續(xù)的局部炎癥紅腫反應，并對蝎毒誘導的外周及中樞機制展開了研究和探討。本論文采用行為學、藥理學、免疫組織化學和電生理學等方法，對蝎毒致傷害性的脊髓上位中樞機制進行了較為系統(tǒng)的研究。主要結果如下：
　　 1．脊髓星型膠質細胞和小膠質細胞的激活在BmK粗毒誘導的大鼠痛相關行為中的作用,前期的研究工作大都集中在外周和中樞傷害性神經(jīng)元，對數(shù)量相當于神經(jīng)元10-50倍的神經(jīng)膠質細胞（Neuroglial ce

3、ll）關注有限。傳統(tǒng)認為，神經(jīng)系統(tǒng)中只有神經(jīng)元才具有傳遞和處理信息的能力，而神經(jīng)膠質細胞只對神經(jīng)元起到營養(yǎng)和支持的作用，并缺乏神經(jīng)信號傳遞與處理的能力。近年來，大量實驗結果表明，在機體受到傷害性刺激時，神經(jīng)膠質細胞會產(chǎn)生許多變化，釋放出大量細胞因子，直接和間接的參與痛覺的形成。
　　 本研究分別采用GFAP和OX-42為脊髓星型膠質細胞和小膠質細胞的標記物，探討了脊髓膠質細胞對BmK粗毒誘導的實驗性大鼠痛相關行為的貢獻。研究結果

4、顯示，(1)在大鼠左后足足心注射BmK粗毒后，可以誘發(fā)脊髓星型膠質細胞和小膠質細胞時間依賴的激活，其中星型膠質細胞自粗毒注射的第3天才被激活，第7天達到激活峰值，第14天開始減退，而小膠質細胞自粗毒注射后4小時便被激活，1天達到激活峰值，第3天開始消退。(2)當提前鞘內注射膠質細胞代謝抑制劑Fluorocitrate或腹腔注射小膠質細胞抑制劑Minocycline后，BmK粗毒誘導的自發(fā)痛行為、原發(fā)性熱痛敏和雙側機械痛敏均被抑制。(3)

5、Minocycline可以部分的抑制BmK粗毒誘導的脊髓c-Fos表達，但對足部局部水腫沒有任何壓抑作用。(4)BmK粗毒注射后第七天再給予鞘內注射Fluorocitrate或腹腔注射Finocycline，對BmK粗毒誘導的痛相關行為沒有任何抑制作用。
　　 綜上所述，脊髓膠質細胞參與了BmK粗毒誘導的大鼠痛相關行為，膠質細胞的激活對這一痛相關行為具有重要意義。
　　 2．皮層－丘腦相關腦區(qū)神經(jīng)元對BmKⅠ誘導的傷害性

6、刺激的動態(tài)編碼本研究利用多通道單位神經(jīng)元記錄技術(Multi-channel)，在清醒大鼠上系統(tǒng)觀察了BmKⅠ誘導的實驗性疼痛模型中皮層-丘腦回路神經(jīng)元群對痛相關活動的調制作用。課題選取大鼠初級體感皮層（SI）和前扣帶回皮層(ACC)，以及丘腦背內側核(MD)和丘腦腹后核（VP）為研究腦區(qū)，研究了BmKⅠ毒素單側注射大鼠左后足足心后，相關腦區(qū)和核團的神經(jīng)元響應情況。結果發(fā)現(xiàn)，與福爾馬林等疼痛模型不同，BmKⅠ誘導的實驗性疼痛模型大鼠上述