M2型丙酮酸激酶在人胃癌BGC-823細胞中的生物學功能及其機制.pdf

1、目的:明確PKM2在人胃癌細胞株的表達情況，并應用siRNA技術驗證PKM2對胃癌細胞增殖、遷移及調亡等生物學功能的影響；初步探討PKM2在胃癌細胞中發(fā)揮作用的機制，從而為更深入的研究和早期胃癌診斷及分子靶向治療提供新的思路和理論依據(jù)。
　　方法：本研究通過培養(yǎng)不同分化程度胃癌細胞株，利用半定量RT-PCR，Western-blot等方法在mRNA和蛋白水平，對胃癌中PKM2的表達進行多方法的研究驗證。并以BGC-823作為研究對

2、象，將合成的PKM2-siRNA序列轉染至細胞內，下調PKM2表達，通過熒光定量PCR及Western-blot驗證干擾效果，同時利用CCK8，Transwell及流式細胞分析術在BGC-823胃癌細胞中初步探討了PKM2在胃癌中的功能及機制。
　　結果：在細胞層面，從mRNA和蛋白水平檢測發(fā)現(xiàn)，PKM2在不同分化程度的人胃癌細胞系及永生化人胃粘膜上皮細胞之間均存在表達差異，PKM2表達量隨細胞分化程度的升高而降低，兩種實驗方法檢