CHB患者外周血Th17細胞和單核細胞Tim-3表達.pdf

1、目的：通過了解T細胞免疫球蛋白粘蛋自分子( T cell immunoglobulin mucin，Tim)3在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者外周血單核細胞、Th17細胞上的表達及其與肝臟損傷關(guān)系，探討Tim-3表達在CHB發(fā)病機制中的作用。
　　 方法：(1)流式細胞術(shù)檢測38例CHB組和13例對照組外周血CD4+T細胞表面Tim-3的表達，并以細胞內(nèi)因了染色技術(shù)(intracellula

2、r cytokine staining, ICCS)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)對其中22例CHB組外周血中Th17細胞頻數(shù)以及血漿IL-17濃度進行檢測，同時分析其與ALT、TBil、PTA、HBVDNA、HBeAg等之間的相關(guān)性。(2)流式細胞術(shù)檢測上述10例CHB組外周血中Th17細胞上Tim-3的表達，并分析其與ALT、TBil、PT、HBVDNA、HB

3、eAg等之間相關(guān)性。(3)體外培養(yǎng)的PBMCs中加Tim-3單克隆抗體阻斷Tim-3/Tim-3L通路，ELISA檢測上清IL-17的表達水平。(4)流式細胞術(shù)檢測25例CHB組和13對照組CD14+CD16-單核細胞、CD14+CD16+單核細胞表面Tim-3的表達，分析紐間差異以及CHB組單核細胞Tim-3表達與ALT、TBil、PTA、HBVDNA、HBeAg等之間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：(1)CHB組表達Tim-3的CD

4、4+T細胞頻數(shù)為6.32±4.44％，對照組表達Tim-3的CD4T細胞頻數(shù)為3.20±2.70％，CHB組表達Tim-3的CD4T細胞頻數(shù)高于對照紐，有統(tǒng)計學(xué)意義，t=2.578，P＜0.05。CHB組表達Tim-3的CD4+T細胞頻數(shù)與ALT、TBil、PTA、HBVDNA以及HBeAg均無相關(guān)性。CHB組Th17細胞頻數(shù)為3.40±1.82％，對照組Th17細胞頻數(shù)為2.21±0.90％,CHB組Th17細胞頻數(shù)高于對照組，有統(tǒng)計

5、學(xué)意義，t=2.663,P＜0.05;CHB組Th17細胞頻數(shù)與PTA負相關(guān)，r=-0.488,P＜0.05。CHB組血漿IL-17水平為154.09±79.62pg/ml,對照組血漿IL-17水平為265.34±99.07，CHB組血漿IL-17水平低于對照組，有統(tǒng)計學(xué)意義，t=3.902，P＜0.01。CHB組血漿IL-17含量與HBVDNA載量負相關(guān)，r=-0.477,P＜0.05;CHB組血漿1L-17含量與TBil水平負相關(guān)，

6、r=-0.504,P＜0.05。(2)CHB組未發(fā)現(xiàn)有表達Tim-3的Th17細胞，部分對照組Th17細胞低表達Tim-3。(3)阻斷Tim-3信號通路能促進CHB組PBMCs表達IL-17。(4)CHB組表達Tim-3的CD14+CD16+單核細胞頻數(shù)為69.50±21.52％，對照組表達Tim-3的CD14+CD16'單核細胞頻數(shù)為38.83±15.52％,CHB組表達Tim-3的CD14+CD16+單核細胞頻數(shù)高于對照組，有統(tǒng)計學(xué)

7、意義，t=3.398，P＜0.01。
　　 結(jié)論：(1)CHB組外周血CD4+T細胞Tim-3表達升高。(2)CHB組外周血Th17細胞頻數(shù)增高，與PTA負相關(guān)；而外周血漿IL-17含量較對照組降低，與HBVDNA載黽和TBil水平負相關(guān)。(3)Tim-3單克降抗體阻斷Tim-3信號通路能促進CHB組PBMCs表達IL-17。(4)CHB紐CD14+CD16+單核細胞上調(diào)表達Tim-3。(5)外周血CD4+T細胞和單核細胞高表達