版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、以牛睪丸為材料,通過0.01mol/L Tris-HCl緩沖液(pH7.5,內(nèi)含0.2mol/L NaCl)抽提、硫酸銨分級(jí)分離獲得粗酶,通過DEAE-Cellulose(DEAE-32)陰離子交換柱、Sephacry S-300凝膠過濾柱層析2次層析純化,獲得比活力為658.21 U·mg1的聚丙烯酰胺凝膠電泳單一純N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制劑(NAGase,EC3.3.1.52)。測(cè)得酶的等電點(diǎn)為5.54,分子量約為68.3
2、 kDa,每個(gè)酶蛋白分子含有364個(gè)氨基酸殘基,其中非極性占35.2%,堿性占16.4%,酸性占24.2%;極性不帶電荷的占24.2%。該酶為單亞基酶,肽鏈內(nèi)含有二硫鍵。該酶為糖蛋白,其中含糖量為3.03%(W/W)。以對(duì)硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(pNP-NAG)為底物,測(cè)得該酶在0.2mol/L磷酸緩沖液(pH5.6)中催化水解pNP-NAG的最適pH為5.6,最適溫度為50℃。該酶在pH3.0~6.6區(qū)域較穩(wěn)定;在55℃
3、以下處理30 min,酶活力保持穩(wěn)定。在pH5.6的條件下,酶水解pNP-NAG的米氏常數(shù)Km為0.71mmol·L-1,最大反應(yīng)速度Vm為16.716μmol·L-1·min-1,酶催化pNP-NAG反應(yīng)的活化能Ea為64.19kJ·mol-1。 金屬離子對(duì)牛睪丸NAGase活力影響的研究表明:Na+在低濃度(0~10mmol/L)下對(duì)酶的活力沒有影響,在高濃度(0~1.0mol/L)下, Na+對(duì)酶有微弱的抑制作用。Cu2+
4、對(duì)酶有微弱的抑制作用。Mg2+、Ca2+、Zn2+、Mn2+對(duì)酶有不較強(qiáng)的抑制作用。Mg2+、Ca2+、Zn2+、Mn2+對(duì)酶的抑制表現(xiàn)均為可逆非競(jìng)爭(zhēng)性抑制機(jī)制,Mg2+、Ca2+、Zn2+、Mn2+對(duì)酶的抑制常數(shù)KI分別為75.26mmol·L-1、87.37 mmol·L-1、2.21 mmol·L-1和41.18 mmol·L-1。 研究15種氨基酸對(duì)牛睪丸NAGase活力影響的結(jié)果表明:在特定濃度范圍內(nèi),L-Ile、L-
5、Met,L-Phe、L-Ala,L-Leu,L-Pro等非極性氨基酸對(duì)牛睪丸NAGase的活力沒有顯著影響, L-Thr、L-Gly、L-Gln、L-Ser、L-Asn、L-His等極性氨基酸對(duì)酶活力也沒有顯著影響,L-Val對(duì)酶活力有微弱的激活作用,L-Arg、L-Lys對(duì)牛睪丸NAGase有不同程度的抑制作用。L-Arg對(duì)酶的抑制表現(xiàn)為可逆非競(jìng)爭(zhēng)性機(jī)制,L-Arg的KI為24.22 mmol·L-1。L-Lys對(duì)酶的抑制表現(xiàn)為可逆反
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 山麻鴨睪丸N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分離純化與性質(zhì)研究.pdf
- 菜青蟲N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性質(zhì)研究.pdf
- 棉鈴蟲N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的分離純化及性質(zhì)研究.pdf
- 瘦肉型豬精液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶同工酶的分離純化與性質(zhì)研究.pdf
- 鋸緣青蟹內(nèi)表皮N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性質(zhì)研究.pdf
- 棉鈴蟲N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力調(diào)控的研究.pdf
- “新吉富”尼羅羅非魚N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性質(zhì)研究.pdf
- 鋸緣青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性質(zhì)及活力調(diào)控的研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦殼膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性質(zhì)及活力調(diào)控.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力調(diào)控的研究.pdf
- 克氏原螯蝦N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的性質(zhì)及活力調(diào)控.pdf
- 鋸緣青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的抑制動(dòng)力學(xué)研究.pdf
- 效應(yīng)物對(duì)中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影響.pdf
- 南美白對(duì)蝦N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶的活力調(diào)控及動(dòng)力學(xué)研究.pdf
- 腸球菌中β-D-葡萄糖苷酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf
- N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酸試劑盒制備及其臨床應(yīng)用研究.pdf
- N-乙酰氨基葡萄糖苷酶及其殼聚糖納米材料固定化酶抗細(xì)菌生物被膜作用研究.pdf
- N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NagY1及其對(duì)伴放線放線桿菌生物膜作用的研究.pdf
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)的研究.pdf
- 30770.球孢白僵菌n乙酰氨基葡萄糖苷酶bbnag1的功能分析
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論