乳與乳制品中亞硝酸鹽的測(cè)定

1、二、乳與乳制品中亞硝酸鹽的測(cè)定：二、乳與乳制品中亞硝酸鹽的測(cè)定：亞硝酸鹽廣泛存在于自然界，在乳與乳制品中都有一定的含量?，F(xiàn)已證明，亞硝酸鹽與食品中固有的胺類化合物是產(chǎn)生致癌物質(zhì)亞硝胺的前體物質(zhì)，是潛在的致癌物質(zhì)，亞硝酸鹽含量過高會(huì)引起高鐵蛋白癥。因此，對(duì)乳與乳制品亞硝酸鹽含量的檢測(cè)和控制是非常有必要的。在乳與乳制品測(cè)定亞硝酸鹽的過程中，將樣品沉淀脂肪和蛋白質(zhì)后，進(jìn)行過濾。在濾液中加入磺胺和N1萘基乙二胺二鹽酸鹽，使其顯粉紅色，然后用分光

2、光度計(jì)在其最大吸收波長(zhǎng)538nm下測(cè)定其吸光度。將測(cè)得的吸光度與亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度進(jìn)行比較定量。1主要試劑和儀器1.1儀器：UV2550型紫外可見分光光度計(jì)（島津有限公司）1.2試劑：標(biāo)準(zhǔn)亞硝酸鹽溶液：GBW（E）0802230504水中亞硝酸鹽氮濃度：100mgmL并逐級(jí)稀釋為0.9857μgmL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液；硫酸鋅溶液：535gL亞鐵氰化鉀溶液：172gL鹽酸氨水緩沖溶液：pH9.6~9.7；顯色液1：鹽酸：水=450：5

3、50（V：V）鹽酸溶液；顯色液2：5gL磺胺溶液；顯色液3：1gL萘胺鹽酸鹽溶液。試驗(yàn)中所用試劑均為分析純，所用水為去離子水。2試驗(yàn)方法2.1入射光波長(zhǎng)的選擇國(guó)標(biāo)《GBT5413.321997乳粉硝酸鹽、亞硝酸鹽的測(cè)定》中規(guī)定最大吸收波長(zhǎng)為538nm，但在實(shí)驗(yàn)過程中，做光譜掃描時(shí)，最大吸收波長(zhǎng)往往因?yàn)闃悠返牟煌l(fā)生變化，發(fā)上紅移或藍(lán)移的現(xiàn)象?？紤]到測(cè)定的靈敏度，應(yīng)采用最大吸收波長(zhǎng)作為入射光波長(zhǎng)。所以，在進(jìn)行定量分析之前，應(yīng)先才用光譜掃

4、描進(jìn)行峰形和峰位的確認(rèn)。以表1的儀器條件，對(duì)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行掃描，光譜圖如圖1。圖1中曲線均比較平滑，為了消除干擾組分的吸收，采用“吸收最大，干擾最小”的原則，即所選擇的測(cè)定波長(zhǎng)處待測(cè)組分的吸收最大，但干擾組分的吸收最??；從消除非單色光引起的對(duì)郎伯比爾定律的偏離角度考慮，應(yīng)選用吸收曲線比較平坦部分對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)的光作為入射光波長(zhǎng)。綜上所述，應(yīng)選擇圖1中538nm作為入射光波長(zhǎng)，與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)一致。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=0.0011C0.0005，

5、相關(guān)系數(shù)r2=0.9999。2.3樣品測(cè)定2.3.1樣品前處理稱90.0g左右牛乳樣品，按順序加入25mL硫酸鋅溶液，25mL亞鐵氰化鉀溶液，40mL鹽酸氨水緩沖溶液，每加一種試劑充分混合，用去離子水定容于250mL容量瓶中，靜置40min用定性中速濾紙過濾后收集濾液。2.4.2樣品測(cè)定移取20mL濾液于50mL容量瓶中，加3mL顯色液1，2.5mL顯色液2，搖勻，靜置5min；加1mL顯色液3，靜置5min，定容后靜置5min，上機(jī)測(cè)

6、定。3結(jié)果與討論干擾消除一般有兩種方法，一類是不分離的情況下消除干擾，另一類是分離雜質(zhì)消除干擾。因?yàn)樵诜蛛x過程中，會(huì)造成硝酸鹽和亞硝酸的損失，所以一般在不分離的情況下消除干擾。本試驗(yàn)采用雙光束分光光度法，在不分離的情況下消除干擾。3.1在樣品前處理后，在濾液中的某些成分影響被測(cè)組分吸光度時(shí)，將構(gòu)成干擾，影響測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。干擾離子與試劑生成有色配合物，使測(cè)定結(jié)果偏高；干擾離子與試劑反應(yīng)，生成的配合物雖然無色，但消耗大量的顯色劑，使被測(cè)

7、離子的顯色反應(yīng)不完全，使測(cè)定結(jié)果偏低；與被測(cè)離子結(jié)合成離解度小的另一種化合物，使被測(cè)離子與顯色劑不反應(yīng)，使測(cè)定結(jié)果偏低。加入鹽酸氨水緩沖溶液，控制溶液的酸度，從而有效的消除了干擾。因?yàn)榭刂迫芤核岫仍谝欢ǚ秶?，可以使亞硝酸鹽與顯色劑反應(yīng)，干擾離子不能生成有色化合物。3.2選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤海@色劑本身顏色和某些共存的有色離子的干擾。干擾離子本身有顏色，使測(cè)定結(jié)果偏高；本試驗(yàn)選擇溶劑參比和試液參比分別進(jìn)行考察：溶劑參比：當(dāng)顯色劑及其他溶

8、劑均無色，被測(cè)溶液中又無其他有色離子時(shí)，可用溶劑去離子水做參比溶液。試液參比：顯色劑無色，被測(cè)溶液中有其他有色離子，可采用不加顯色劑的被測(cè)溶液做參比溶液。以去離子水作溶劑參比，只能消除吸收池壁對(duì)光的反射和散射所帶來的干擾；以被測(cè)溶液作試液參比，不僅能消除吸收池壁對(duì)光的反射和散射帶來的干擾，還能消除濾液中共存離子對(duì)光的選擇性吸收所帶來的干擾。所以采用不加顯色劑的濾液作試液參比。3.3選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)消除干擾。入射光波長(zhǎng)的選擇必須從靈敏度與選