攜帶KGF基因的減毒沙門氏菌(SPK)的構建及其治療作用.pdf

1、角質細胞生長因子(keratinocyte growth factor，KGF)可調節(jié)多種上皮細胞的增殖、遷移和分化過程，目前已用于治療多種疾病。但是，KGF蛋白在體內的半衰期較短，而大劑量多次給藥又會引起嚴重的不良反應，加之KGF重組蛋白價格昂貴，限制了其臨床應用。因此，本研究擬采用減毒沙門氏菌作為載體，觀察KGF基因藥物對于疾病的治療效果。
　　 通過基因工程方法，將KGF基因連接至真核表達載體，經電轉化方法將其導入減毒沙門

2、氏菌中，并鑒定出了攜帶KGF基因的陽性菌株，命名為Salmonella-plasmid-KGF菌株，簡稱為SPK菌株，然后觀察了SPK對三種常見難治性疾病的治療效果。
　　 輻射復合皮膚損傷是一種難愈合的創(chuàng)面，傷口愈合緩慢，而且易出現感染、水腫等并發(fā)癥，目前仍無有效的治療方法。首先用SPK菌株轉染人角質形成細胞系HaCaT細胞，證明KGF基因可在細胞內高效表達，并促進細胞增殖。在大鼠輻射復合皮膚損傷模型中，局部傷口周圍注射SPK

3、菌株可抑制炎癥反應，促進血管新生和肉芽組織的形成，提高皮膚傷口愈合速率。
　　 放射治療可引起輻射性肺炎、肺纖維化等嚴重的副作用，極大地影響病人的生活質量，干擾腫瘤治療效果。通過氣管滴注SPK菌株，可顯著降低X射線引起的大鼠肺組織損傷，抑制炎癥反應，降低肺灌洗液中的總細胞數；使得肺組織中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性升高，同時丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量下降，抵御了

4、氧自由基(reactive oxygen species，ROS)積累造成的損傷；此外，給予SPK還可調節(jié)某些細胞因子的表達水平，維持肺臟正常的生理功能。
　　 潰瘍性結腸炎是一種病因不明、復發(fā)率高、難治愈的炎癥性腸病，目前尚缺乏有效的治療藥物。在乙酸誘導的大鼠潰瘍性結腸炎中，口服SPK菌株，可明顯緩解結腸炎癥狀；抑制腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的過量表達，降低炎癥反應；降低RO