凈固片制備工藝與質(zhì)量標準研究.pdf

1、目的：
　　凈固片來源于經(jīng)典古方“凈固丸”，史載于《儒門事親》，其主要組方為槐花、枳殼，其作為經(jīng)典藥對歷來是抗痔瘡類中藥的核心主藥，如槐角丸等，所含主要成分蘆丁和柚皮苷，具備顯著的抗炎和抗微循環(huán)作用。蘆丁和柚皮苷亦是化學藥“強力痔根斷、愛脈朗”主要活性成分。本論文以槐花和枳殼中的蘆丁和柚皮苷等主要活性成分為指標，對凈固片的制備工藝和質(zhì)量標準進行了研究。
　　方法：
　　凈固片制備工藝的研究：本章對凈固片組方中生藥進行了

2、水提、醇沉和干燥得到凈固片提取物，并對工藝參數(shù)進行了考察，然后對凈固片的片劑工藝中輔料和包衣進行了考察，最后分別對各工藝進行了中試研究。1、以總黃酮含量為指標，采用正交試驗設(shè)計分別對水提工藝中加水量、提取時間、提取次數(shù)和粉碎度等因素進行優(yōu)化和醇沉工藝中生藥提取后的濃縮液濃度、乙醇濃度和靜置時間等因素進行優(yōu)化。然后以樣品含水量及總黃酮含量為評價指標，對干燥工藝中干燥溫度和干燥時間因素進行考察；2、采用粉末直接壓片法，以粉末的流動性和可壓性

3、、素片的崩解時限、硬度和脆碎度為主要考察指標，分別對輔料種類、輔料配比、崩解劑的種類和用量進行了組方篩選，并對素片的薄膜包衣的包衣液配方、包衣方案和包衣增重進行了考察和研究。
　　凈固片質(zhì)量標準的研究：采用薄層色譜法、紫外可見分光光度法和HPLC法分別對凈固片的質(zhì)量進行定性和定量分析。1、薄層色譜法定性鑒別，用硅膠G薄層板，以乙酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）為展開劑，以三氯化鋁試液為顯色劑，紫外光燈365 nm下檢視；2、紫外可見

4、分光光度法定量分析，以蘆丁為對照品，在波長257 nm處對樣品中的總黃酮進行含量測定；3、HPLC法定量分析凈固片中蘆丁、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷及槲皮素五個活性成分的含量，HPLC色譜條件：依利特 Kromasil-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流動相0.2％冰醋酸-乙腈（B）梯度洗脫（0~10 min，12%~15%B；10~15 min，15%~17%B；15~25 min，17%B；25~35 min，17

5、%~20%B；35~45 min，20%~22% B；45~60 min，22%~40%B），柱溫30℃，進樣量10μL，流速1.0mL/min，蘆丁和槲皮素檢測波長為254 nm，柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷檢測波長為283 nm。
　　結(jié)果：
　　凈固片制備工藝研究表明：1、“凈固片提取物”制備工藝：取枳殼（粗顆粒）生藥及槐花（炒）生藥，以12倍量水溶液，常壓加熱回流提取3次，每次2小時，合并三次提取液，將合并的提取液濃縮，

6、濃縮液體積為原生藥的2倍（體積與重量比：mL/g），加適量乙醇，使乙醇濃度達到70%，靜置過夜，收集上清液，減壓（55~60℃，0.09~0.10MPa，濃縮比重約1.25 g/cm3），60℃減壓真空干燥12h（真空度0.09~0.10 MPa，含水量2.31%，總黃酮含量28.90%）。中試研究結(jié)果與小試研究數(shù)據(jù)基本吻合，主要工藝流程各項參數(shù)重復性良好。2、制劑工藝：原輔料分別過80目篩備用，將凈固片提取物、乳糖、微晶纖維素、交聯(lián)聚

7、維酮、硬脂酸鎂和微粉硅膠按50.0：16.6：30.0：2.0：0.7：0.7的比例充分混合均勻，直接粉末壓片得素片；然后配制16%的歐巴代包衣溶液，并將素片在烘箱中預熱至約40～50℃，再將包衣鍋內(nèi)的片床溫度升至70℃左右，開啟噴槍，在初始包衣過程中，包衣鍋轉(zhuǎn)速在0.8～4 r/min，噴槍流速需控制在2～6 mL/min，至片芯包上一層薄薄的衣膜后，再逐步加快包衣鍋轉(zhuǎn)速和噴槍的流速，控制包衣鍋轉(zhuǎn)速在5～13 r/min，噴槍流速為7

8、～15 mL/min；至片芯增重2.86%停止包衣；將包衣后的片子置于50℃烘箱中固化1 h，得合格薄膜包衣片。中試放大生產(chǎn)過程中生產(chǎn)順利、重現(xiàn)性好，各項質(zhì)量指標考察合格。
　　凈固片的質(zhì)量標準研究結(jié)果顯示：1、凈固片薄層色譜鑒別結(jié)果表明供試品色譜中，在對照藥材或?qū)φ掌飞V相應(yīng)的位置上，蘆丁和柚皮苷斑點清晰，且陰性對照在相應(yīng)位置無干擾；2、紫外-可見分光光度法測定結(jié)果表明凈固片的總黃酮在4.89μg/mL~24.44μg/mL有良

9、好的線性關(guān)系（r=0.9999），該法的平均加樣回收率為97.37%，RSD為0.22%，凈固片中總黃酮的含量為39.00 mg/片；3、HPLC測定結(jié)果表明蘆丁在0.0125~0.5004 mg/mL（r=1.0000），柚皮苷在0.0100~0.4008 mg/mL（r=0.9999），橙皮苷在0.0033~0.0327 mg/mL（r=0.9992），新橙皮苷在0.0113~0.2256 mg/mL（r=0.9999），槲皮素在0

10、.0041~0.0813 mg/mL（r=0.9998）與峰面積具有良好的線性關(guān)系，平均回收率均在98%～102%，凈固片中蘆丁、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷及槲皮素的含量分別為9.40 mg/片、4.67 mg/片、0.41 mg/片、3.81 mg/片、0.92 mg/片。
　　結(jié)論：1、“凈固片提取物”制備工藝簡單方便，穩(wěn)定可靠；2、優(yōu)選的制劑工藝制備的成品片劑脆碎度、硬度均符合要求，表明工藝組方設(shè)計合理，工藝穩(wěn)定；3、薄層鑒別