β2受體介導巨噬細胞的分化對動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的影響及意義的研究.pdf

1、目的：
　　探討經β2受體介導，影響脂多糖及干擾素γ（LPS+IFN-γ）或白介素4（IL-4）誘導THP-1源巨噬細胞向M1型或M2型的分化及意義。
　　方法：
　　以LPS+IFN-γ刺激THP-1源巨噬細胞向M1型極化，以IL-4刺激THP-1源巨噬細胞向M2型極化；其間分別以不同濃度的β2受體激動劑和對β2受體具不同選擇性多種β受體阻滯劑干預，采用經典方法分別進行M1、M2型細胞鑒定：用酶聯(lián)免疫法（ELISA）

2、檢測不同誘導狀態(tài)下THP-1源巨噬細胞的TNF-α和IL-10的分泌量。熒光定量PCR檢測與巨噬細胞相關的精氨酸酶-1（Arg-1）、一氧化氮合酶（iNOS）的mRNA的表達水平，流式細胞技術檢測細胞表面分子CD80、CD206的表達水平。同時以流式細胞技術檢測以不同濃度的β2受體激動劑與對β2受體具不同選擇性多種β受體阻滯劑干預并吞噬了OX-LDL24小時后，各組凋亡細胞數和存活細胞數。
　　結果：
　　1.β2受體激動劑

3、沙丁胺醇抑制TNF-α的分泌，抑制iNOS mRNA和CD80的表達，同時促進IL-10的分泌，增加Arg-1 mRNA和CD206的表達；選擇性β1受體阻滯劑美托洛爾，非選擇性β受體阻滯劑普萘洛爾，高選擇性β2受體阻滯劑ICI118551則均可促進TNF-α的分泌，促進iNOS mRNA和CD80的表達，同時抑制IL-10的分泌，減少Arg-1 mRNA和CD206的表達。
　　2.β2受體激動劑沙丁胺醇隨濃度增高，凋亡率和壞死

4、率增加，細胞存活率降低。與OX-LDL組相比，沙丁胺醇低、中濃度組細胞存活率比OX-LDL組高，但差異無顯著性，高濃度組細胞存活率比OX-LDL組低，差異有顯著性。對β2受體具不同選擇性的β受體阻滯劑美托洛爾組、普萘洛爾組和ICI118551組則是隨濃度增高，細胞凋亡率和壞死率呈降低趨勢，細胞存活率呈增加趨勢，組間有顯著性差異，與OX-LDL組相比，低、中濃度組細胞存活率有顯著性差異，但高濃度組細胞存活率則無顯著性差異。
　　結論

5、：
　　1.β2受體激動劑沙丁胺醇能夠抑制LPS+IFN-γ誘導THP-1細胞向M1型分化，促進IL-4誘導THP-1細胞向M2型分化。美托洛爾組、普萘洛爾組和ICI118551組能夠促進LPS+IFN-γ誘導THP-1細胞的向M1型分化，抑制IL-4誘導THP-1細胞向M2型分化。
　　2.β2受體激動劑沙丁胺醇隨著濃度增加，促進細胞凋亡和壞死，降低細胞存活率。對β2受體具不同選擇性的β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾和ICI