BMSCs通過(guò)增強(qiáng)自噬發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用.pdf

1、目的:骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）是具有神經(jīng)保護(hù)作用的多能干細(xì)胞，盡管細(xì)胞分化替代及旁分泌機(jī)制被廣泛認(rèn)可，但是它真正的神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制并不清楚，本文就是為了探討B(tài)MSCs是否可以通過(guò)自噬增強(qiáng)來(lái)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
　　材料與方法:利用分子克隆技術(shù)與慢病毒轉(zhuǎn)染的方法獲得過(guò)表達(dá)人野生型及致病突變A53Tα-突觸核蛋白（α-synuclein）單克隆人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞株；穩(wěn)定過(guò)表達(dá)突變型A53Tα-synuclein的SH-

2、SY5Y細(xì)胞經(jīng)氧化呼吸鏈抑制劑魚(yú)藤酮處理后與BMSCs共培養(yǎng)，MTT法測(cè)定共培養(yǎng)組與非共培養(yǎng)組細(xì)胞存活率變化；蛋白免疫印跡法觀(guān)察自噬水平和α-synuclein變化；Annexin V-PE/7-AAD雙染流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡率變化。自噬抑制劑3-MA和自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素預(yù)處理24小時(shí)后與BMSCs共培養(yǎng)觀(guān)察以上指標(biāo)的變化。
　　結(jié)果:魚(yú)藤酮會(huì)降低過(guò)表達(dá)A53Tα-synuclein的SH-SY5Y細(xì)胞存活率，呈時(shí)間與劑量依賴(lài)性

3、，BMSCs可以保護(hù)細(xì)胞免受魚(yú)藤酮引起的細(xì)胞損傷；BMSCs可以增強(qiáng)A53T細(xì)胞的自噬水平和減少α-synuclein的聚集；BMSCs還可以降低魚(yú)藤酮引起的細(xì)胞凋亡。自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素可以增強(qiáng)BMSCs細(xì)胞保護(hù)作用、增強(qiáng)自噬和降低凋亡率，相反自噬抑制劑3-MA降低BMSCs的細(xì)胞保護(hù)作用，抑制自噬，增加細(xì)胞的凋亡率。
　　結(jié)論:BMSCs通過(guò)增強(qiáng)自噬降低α-synuclein的水平，進(jìn)而提高細(xì)胞的存活率，降低細(xì)胞凋亡率。BMSC