水通道蛋白3通過(guò)增強(qiáng)自噬促進(jìn)胃癌對(duì)順鉑耐藥.pdf

1、背景：
　　胃癌(Gastric Cancer，GC)是我國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居消化道腫瘤之首，死亡率列全部腫瘤的2～3位，是嚴(yán)重威脅我國(guó)人民生命健康的疾病之一。目前胃癌治療方法主要包括根治性手術(shù)治療、化學(xué)藥物治療（簡(jiǎn)稱“化療”）以及分子靶向治療等。在我國(guó)，絕大部分胃癌患者確診時(shí)多為進(jìn)展期，而進(jìn)展期胃癌患者必須有賴于新輔助化療或術(shù)后輔助化療以改善其長(zhǎng)期生存，而化療耐藥的產(chǎn)生常導(dǎo)致化療失敗，嚴(yán)重影響患者預(yù)后。順鉑(cis

2、platin，cDDP)作為治療胃癌的一線化療藥物之一，其耐藥性也在不斷上升。因此，深入研究胃癌對(duì)順鉑化療的耐藥機(jī)制，降低胃癌對(duì)順鉑的耐藥性，是提高胃癌療效的重要策略之一。
　　水通道蛋白3（aquaporin3，AQP3）是水通道蛋白家族(aquaporins，AQPs)成員之一，具有介導(dǎo)滲透壓依賴性跨生物膜水轉(zhuǎn)運(yùn)作用，對(duì)甘油等小分子物質(zhì)亦具有通透性。我們前期研究表明AQP3在胃癌組織中過(guò)表達(dá)，AQP3在胃癌的腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中

3、可能發(fā)揮重要作用，AQP3的上調(diào)通過(guò)促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)和胃癌細(xì)胞的干細(xì)胞干性促進(jìn)GC細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。但是，AQP3在胃癌對(duì)化療藥物耐藥中的作用尚不清楚。
　　自噬(autophagy)是真核細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的大分子物質(zhì)和細(xì)胞器被運(yùn)送至溶酶體隔離并降解的過(guò)程，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞自身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新。自噬是生理?xiàng)l件和病理?xiàng)l件下普遍存在的現(xiàn)象，不僅參與維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)，同時(shí)還與腫瘤的發(fā)生發(fā)展以及腫瘤耐藥密切相關(guān)。
　　深入

4、了解AQP3在促進(jìn)胃癌細(xì)胞自噬中的作用，有助于闡明胃癌化療耐藥的機(jī)制，進(jìn)一步明確AQP3在胃癌化療耐藥中的作用，將為AQP3作為胃癌治療的靶點(diǎn)提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.選取三種胃癌細(xì)胞株，即MGC803、SGC7901和AGS細(xì)胞，分別用慢病毒轉(zhuǎn)染，使MGC803和SGC7901低表達(dá)AQP3(標(biāo)記為MGC803-AQP3low，SGC7901-AQP3low)，AGS高表達(dá)AQP3(標(biāo)記為AGS-AQP

5、3high)。
　　2.采用CCK-8細(xì)胞毒性試驗(yàn)檢測(cè)不同AQP3表達(dá)水平的細(xì)胞對(duì)cDDP的敏感性以及對(duì)cDDP和氯喹(chloroquine，CQ)聯(lián)合用藥的敏感性。
　　3.采用Western blot、激光共聚焦等方法檢測(cè)AQP3與自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.胃癌細(xì)胞中AQP3的表達(dá)水平與其對(duì)化療藥物順鉑的敏感性顯著相關(guān):低表達(dá)AQP3后，MGC803-AQP3low及SGC7901-AQP3

6、low對(duì)cDDP敏感性增強(qiáng);高表達(dá)AQP3后，AGS-AQP3high對(duì)cDDP敏感性降低。
　　2.胃癌細(xì)胞中AQP3表達(dá)水平與細(xì)胞自噬水平顯著相關(guān):低表達(dá)AQP3后，MGC803-AQP3low及SGC7901-AQP3low自噬水平減弱;高表達(dá)AQP3后，AGS-AQp3high自噬水平增強(qiáng)。
　　3.聯(lián)合CQ處理后，胃癌細(xì)胞對(duì)cDDP的敏感性增強(qiáng)。CQ可以逆轉(zhuǎn)AQP3誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞對(duì)cDDP耐藥。
　　結(jié)論：<