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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本課題利用基因芯片及生物信息學(xué)技術(shù),探索穩(wěn)定性心絞痛(stable angina pectoris, SAP)長(zhǎng)鏈非編碼 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表達(dá)譜,篩選穩(wěn)定性心絞痛特異性lncRNA,初步探索差異表達(dá)lncRNA可能生物功能的初步信息,發(fā)現(xiàn)新的冠心病診斷的分子標(biāo)記物。
方法:選擇穩(wěn)定性心絞痛患者及健康人群(non-SAP)各5例,抽取各自血液樣本,分別提取RNA后,利用基因芯片
2、對(duì)lncRNA和微小RNA(MicroRNA,mRNA)進(jìn)行表達(dá)分析。采用散點(diǎn)圖、火山圖、聚類分析等方法,建立穩(wěn)定型心絞痛相關(guān)lncRNA及mRNA差異表達(dá)譜。根據(jù)FC(abc)值>2, P<0.05,初步篩選特異高表達(dá)lncRNA。利用生物信息學(xué)方法對(duì)差異表達(dá)的lncRNA。與 mRNA進(jìn)行聯(lián)合分析。具體包括:KEGG Orthology Based Annotation System(KOBAS)分析和Gene Ontology(G
3、O)分析;lncRNA-mRNA關(guān)聯(lián)分析。預(yù)測(cè)差異表達(dá)的1ncRNA可能參與的生物功能。
結(jié)果:分別將SAP的1ncRNA和mRNA的表達(dá)量與non-SAP比較。 LncRNAs及mRNA表達(dá)譜差異表達(dá)基因分別為22154條和25138條;SAP組根據(jù) FC(abc)值>2,P<0.05標(biāo)準(zhǔn)篩選后,lncRNA共有399條,其中上調(diào)226條,下調(diào)173條。同樣標(biāo)準(zhǔn)篩選,mRNA共有458條,其中上調(diào)347條,下調(diào)111條。GO
4、功能富集包含分子代謝(能量、鋅離子代謝等)、網(wǎng)格蛋白泡膜、腫瘤壞死因子反應(yīng)性、氧化應(yīng)激傳導(dǎo)、負(fù)向調(diào)控組蛋白等相關(guān)功能;信號(hào)通路富集包含EGF受體調(diào)控、DAG及IP3調(diào)控、HSF1激活、生理節(jié)律、蛋白羧化,運(yùn)送及分裂、Akt激活PI3K等相關(guān)通路;著富集到的疾病包含代謝性疾病、高血壓、動(dòng)脈相關(guān)疾病、鈣離子阻滯相關(guān)疾病、認(rèn)知功能減退等相關(guān)疾病。
結(jié)論:在穩(wěn)定性心絞痛中,lncRNA和 mRNA有大量表達(dá)顯著上調(diào)或下調(diào),提示很大程度
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