長鏈非編碼RNA-SRHC在肝癌中的表達和功能.pdf

1、目的:一、進一步了解肝癌中長鏈非編碼RNA表達的改變及其臨床意義。
　　 二、進一步了解長鏈非編碼RNA在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 方法:一、從前期所做的高轉(zhuǎn)移性肝癌和低轉(zhuǎn)移性肝癌長鏈非編碼RNA表達譜芯片中挑選一條在癌與癌旁有明顯差異以及在高轉(zhuǎn)移性肝癌和低轉(zhuǎn)移性肝癌之間有差異表達的lncRNA。
　　 二、通過5'3'RACE實驗得該長鏈非編碼RNA的全長序列。
　　 三、從東方肝膽外科醫(yī)院國家肝臟

2、組織樣本庫挑選81例肝癌病人的癌組織及遠端正常肝臟組織，利用實時定量PCR的方法檢測該長鏈非編碼RNA在這些樣本中的表達，并分析表達量與各臨床指標的相關性。
　　 四、運用甲基化測序等方法研究DNA甲基化對其表達的影響。
　　 五、包裝過表達該長鏈非編碼RNA的慢病毒，以此為工具通過體內(nèi)體外的實驗對其功能進行研究。
　　 結(jié)果:一、該條新的未被研究過的長鏈非編碼RNA（我們稱之為SRHC，StrikinglyRe

3、duced in Hepatocellular Carcinomas）在肝癌中表達顯著下調(diào)，在約80％的肝癌中表達低于對應的癌旁組織，在20％的肝癌組織未能檢測到其表達。
　　 二、SRHC在大部分肝癌細胞系中表達極低或缺失(如SMMU-7721、HCCLM3)。
　　 三、SRHC有三種不同的剪切形式，剪切體1使其最主要的剪切形式。
　　 四、在81例肝癌病人中分析其表達量與臨床病理特征的相關性顯示SRHC的表