異常表達(dá)長鏈非編碼RNA在腦膠質(zhì)瘤中的功能研究.pdf

1、膠質(zhì)瘤是成人最常見的腦內(nèi)原發(fā)性腦腫瘤，惡性程度高，預(yù)后差，占中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的50％以上。手術(shù)、放療、化療仍是治療膠質(zhì)瘤的主要途徑，但接受治療的病人其預(yù)后仍不樂觀。長鏈非編碼RNA(long non coding RNA，lncRNA)是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt的RNA，其本身并不編碼蛋白。然而越來越多的研究發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼RNA影響著腫瘤生長。前期通過基因芯片技術(shù)，我們發(fā)現(xiàn)了一些在膠質(zhì)瘤組織異常表達(dá)的長鏈非編碼，例如(ak12580

2、9，ak098473, uc002ehu.1, bc043564,NR_027322,UBE2CP3-001, loc285194。)
　　最近有研究報道長鏈非編碼RNA loc285194通過結(jié)合抑癌基因的結(jié)構(gòu)域發(fā)揮調(diào)控作用，從而抑制骨肉瘤的生長，然而在腦膠質(zhì)瘤中并沒有報道過該長鏈非編碼RNA對其影響。先前的實(shí)驗中，我們發(fā)現(xiàn)loc285194在腦膠質(zhì)瘤中低表達(dá)。為了進(jìn)一步研究lncRNA285194在腦膠質(zhì)瘤中的影響，我們采用了

3、以下實(shí)驗方法:熒光定量PCR驗證lncRNA loc285194在膠質(zhì)瘤樣本以及U87細(xì)胞中的表達(dá);構(gòu)建過表達(dá)lncRNA loc285194的U87穩(wěn)定細(xì)胞株; CCK8檢測細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞儀檢測凋亡能力。結(jié)果:1、lncRNA loc285194在膠質(zhì)瘤樣本中低表達(dá)且于腫瘤的惡性程度存在相關(guān)性;2、上調(diào)lncRNA loc285194能抑制U87細(xì)胞的增殖;3、上調(diào)lncloc285194能促進(jìn)細(xì)胞凋亡。結(jié)論:在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中上

4、調(diào)lncRNA loc285194能減慢膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長，提示lncRNAloc285194可能成為一個新的治療靶點(diǎn)。
　　LncRNA UBE2CP3-001是研究的第二條長鏈非編碼RNA，其在膠質(zhì)瘤中呈現(xiàn)出高表達(dá)。該基因位于4號染色體長臂12區(qū)帶。目前沒有任何文獻(xiàn)報道該基因在腦膠質(zhì)瘤中的作用，也未有報道其在其他腫瘤中的作用，從而其相對于lncRNA loc285194來講的意義更大。為了進(jìn)一步了解其在腦膠質(zhì)瘤中的功能，我們采用

5、了與研究lncRNA loc285194類似的實(shí)驗方法:1、構(gòu)建慢病毒載體及其干擾序列，敲低LncRNA UBE2CP3-001在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)，篩選后得到穩(wěn)定的細(xì)胞系;2、細(xì)胞功能實(shí)驗;3、小鼠模型構(gòu)建，體內(nèi)實(shí)驗。結(jié)果:1、低表達(dá)的LncRNA UBE2CP3-001腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷徙能力，侵襲能力，增值能力較空白組明顯下降;2、MMP9作為腦膠質(zhì)瘤遷徙及侵襲能力的重要影響因子，敲低LncRNA UBE2CP3-001的腦膠質(zhì)瘤細(xì)