2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩110頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、第一部分:脂氧素A4對大鼠帶蒂皮瓣缺血再灌注損傷保護(hù)作用研究
  目的:研究脂氧素A4對大鼠帶蒂皮瓣缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
  方法:建立大鼠腹壁上動脈帶蒂皮瓣缺血再灌注損傷模型,靜脈注射脂氧素A4,在術(shù)后72小時,通過大體形態(tài)計(jì)算皮瓣成活面積,激光多普勒血流成像檢測皮瓣血流灌注。HE染色觀察皮瓣組織學(xué)改變,ELISA檢測皮瓣中IL-1β,IL-6,TNF-α炎癥因子含量。同時檢測皮瓣中MDA含量及SOD活性。TUNEL

2、染色觀察皮瓣細(xì)胞凋亡比例,通過western blotting檢測抗氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白Nrf2、HO-1及凋亡相關(guān)蛋白Bax,Bcl2含量變化。通過免疫組織化學(xué)染色和western blotting檢測LC3蛋白含量。
  結(jié)果:LA4顯著增加缺血再灌注損傷皮瓣成活面積,增加皮瓣血流灌注量。LA4減輕缺血再灌注導(dǎo)致的組織損傷,降低缺血再灌注損傷皮瓣中MDA含量,升高SOD活性,同時抑制炎癥因子IL-1β,IL-6,TNF-α釋放。L

3、A4抑制皮瓣缺血再灌注損傷所致細(xì)胞凋亡,同時降低Bax表達(dá),促進(jìn)Bcl2表達(dá)。LA4促進(jìn)Nrf2向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)位并促進(jìn)HO-1表達(dá)。LA4還促進(jìn)缺血再灌注損傷皮瓣組織中LC3Ⅰ向LC3Ⅱ轉(zhuǎn)變,提高細(xì)胞自噬水平。
  結(jié)論:LA4通過抑制氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、凋亡,調(diào)節(jié)自噬水平保護(hù)皮瓣組織缺血再灌注損傷。
  第二部分:脂氧素A4對大鼠骨骼肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用研究
  目的:研究LA4對大鼠骨骼肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

4、及相關(guān)機(jī)制。
  方法:建立大鼠下肢肌肉缺血再灌注損傷模型,通過靜脈注射不同劑量的LA4。再灌注后3小時,觀察下肢肌肉組織水腫,免疫熒光染色法標(biāo)記中性粒細(xì)胞浸潤,HE染色觀察肌肉組織損傷狀態(tài),ELISA檢測肌肉組織中炎癥因子TNF-α、IL-Iβ及IL-6含量。同時檢測抗氧化應(yīng)激相關(guān)酶SOD、CAT、GSH-Px活性,TUNEL染色觀察肌細(xì)胞凋亡比例。Western blotting檢測抗氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白Nrf2、HO-1和凋亡相

5、關(guān)蛋白Bax、Bcl2表達(dá)變化。透射電鏡觀察肌肉組織自噬體數(shù)量。免疫熒光染色和western blotting檢測自噬相關(guān)蛋白LC3和Beclin1含量變化。
  結(jié)果:大鼠肌肉缺血再灌注損傷導(dǎo)致肌肉水腫,中性粒細(xì)胞浸潤、肌肉組織學(xué)損傷,炎癥因子水平增高,抗氧化應(yīng)激相關(guān)酶活性下降,細(xì)胞凋亡比例增高。LA4能減輕肌肉組織水腫,減少中性粒細(xì)胞浸潤。LA4還能減輕肌肉組織學(xué)損傷程度。LA4降低缺血再灌注組織中炎癥因子含量,增加抗氧化應(yīng)激

6、相關(guān)酶的活性。LA4還增加抗凋亡蛋白Bcl2表達(dá)并降低促凋亡蛋白Bax表達(dá)。LA4對肌肉缺血再灌注損傷的保護(hù)作用與其激活Nrf2/HO-1信號通路相關(guān),當(dāng)加入HO-1抑制劑(ZnPPⅨ)時,LA4對肌肉組織缺血再灌注損傷的保護(hù)作用明顯被抑制。LA4還促進(jìn)缺血再灌注損傷肌肉組織中自噬體的形成,促進(jìn)LC3Ⅰ向LC3Ⅱ轉(zhuǎn)變,增加Beclin1表達(dá)。
  結(jié)論:LA4通過抑制炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)自噬保護(hù)肌肉組織缺血再灌注損傷

7、,其保護(hù)作用與激活Nrf2/HO-1信號通路相關(guān)。
  第三部分:脂氧素A4對骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用研究
  目的:通過體外培養(yǎng)的骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型,觀察LA4對骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用。
  方法:使用不同濃度的H2O2(0,25,50,100,200,400μmol/L)刺激大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞(L6細(xì)胞),模擬骨骼肌缺血再灌注損傷,確定H2O2損傷骨骼肌細(xì)胞的最佳時間和濃度。在H2O2損傷

8、細(xì)胞前,不同濃度(0,0.1,1,10,100 nmol/L) LA4預(yù)處理細(xì)胞12小時,確定LA4對L6細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的最佳保護(hù)濃度。MTT實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞活性變化,檢測ROS含量判斷細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷程度。光鏡下形態(tài)學(xué)觀察細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷所致細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,并檢測培養(yǎng)液中CK、LDH活性判斷細(xì)胞損傷嚴(yán)重程度。測定細(xì)胞內(nèi)GSH含量判斷細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力。TUNEL染色觀察骨骼肌細(xì)胞凋亡比例,Western Blotting檢測凋亡相關(guān)蛋白

9、Bcl2,Bax含量變化。
  結(jié)果:H2O2氧化應(yīng)激損傷骨骼肌細(xì)胞的最佳濃度為200μmol/L,最佳作用時間為4小時,可造成細(xì)胞活性下降至對照組55%。LA4(10 nmol/L)顯著增加H2O2損傷的骨骼肌細(xì)胞活力。LA4還能夠抑制H2O2損傷所致ROS的生成,抑制CK、LDH向培養(yǎng)液中釋放,促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)GSH的消耗。LA4促進(jìn)Bcl2表達(dá),抑制Bax表達(dá),降低H2O2損傷所致細(xì)胞凋亡比例。
  結(jié)論:LA4在體外培養(yǎng)的

10、骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷中,顯著增加細(xì)胞活力、抑制ROS生成、增加細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力,抑制氧化應(yīng)激損傷所致細(xì)胞凋亡,對骨骼肌氧化應(yīng)激損傷有保護(hù)作用。
  第四部分:脂氧素A4對骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷保護(hù)機(jī)制研究
  目的:在骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型中,研究LA4保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制。
  方法:在體外骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型中,通過免疫熒光染色,westernblotting檢測LA4對Nrf2/HO-1信號通路及自噬

11、水平的影響。同時通過westernblotting檢測LA4對ERK、P38、JNK、PI3K/AKT信號通路的作用,并研究ERK、P38、JNK、PI3K/AKT信號通路與Nrf2/HO-1信號通路、自噬的關(guān)系。
  結(jié)果:LA4在體外骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷時激活Nrf2/HO-1信號通路,促進(jìn)Nrf2向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移,同時增加HO-1蛋白的表達(dá)。LA4提高骨骼肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷時自噬水平。LA4通過激活ERK通路而激活Nrf2/

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論