Smac類似物Birinapant在非小細胞肺癌的放療增敏作用研究.pdf

1、目的:通過體外實驗觀察Birinapant通過抑制IAP蛋白家族成員c-IAP1、c-IAP2從而對非小細胞肺癌的輻射增敏作用。
　　方法:(1)取對數生長期得肺癌細胞H1299。分別設為對照組，Birinapant單獨處理組，γ射線單獨照射組，Birinapant聯合γ射線照射組。MTT法檢測Birinapant對非小細胞肺癌的毒性;流式細胞術檢測Birinapant對非小細胞肺的增敏作用，克隆形成實驗檢測Birinapant對

2、非小細胞肺癌的增敏作用和增敏比。(2) Westernblot和RT-PCR實驗觀察Smac、c-IAP1、c-IAP2的蛋白水平變化以及mRNA的表達水平的變化。
　　結果:(1)克隆形成實驗和MTT實驗表明六種肺癌細胞(A549，H460，H1299，H358，HCC827，H1650)輻射敏感性的為A549和H1299細胞輻射抗性最強，H358抗性最低。Western blot實驗和RT-PCR實驗檢測六種細胞內c-IAP1

3、、c-IAP2蛋白水平高低。結果表明c-IAP1、c-IAP2在A549、H1299中表達量較高，而H460、H358，HCC827，H1650這4種肺癌細胞中表達較少;表明c-IAP1、c-IAP2與肺癌細胞的輻射敏感性有關。(2)不同濃度的Birinapant對非小細胞肺癌H1299的毒性有不同:和對照組相比，低于1μM濃度的Birinapant對肺癌細胞有較微弱的毒性，但是在濃度大于10μM之后，對非小細胞肺癌的毒性不呈劑量依賴的

4、關系。8Gyγ射線聯合Birinapant后24h檢測凋亡水平，聯合組凋亡水平明顯高于單純照射組(P＜0.01)?？寺⌒纬蓪嶒炞C明Birinapant能夠增加肺癌細胞H1299對輻射的敏感性。(3) Western blot實驗結果顯示c-IAP1、c-IAP2發(fā)生明顯降解，但是其mRNA水平沒有明顯下降，說明Birinapant是通過直接調節(jié)蛋白水平的變化而非其轉錄水平的變化。
　　結論:在肺癌細胞中c-IAP1、c-IAP2蛋