威靈仙總皂苷的分離純化及對急性早幼粒細胞白血病NB4細胞體外作用的實驗研究.pdf

1、目的：制備純化的威靈仙總皂苷，體外作用于急性早幼粒細胞白血病NB4細胞，研究威靈仙總皂苷對NB4細胞的作用機制，為臨床用藥提供理論依據(jù)。 方法：①運用大孔吸附樹脂對威靈仙提取液進行分離純化，得到威靈仙總皂苷，并對其含量進行檢測。②設(shè)置多個濃度梯度的威靈仙總皂苷藥物組，觀察用藥后不同時間點的NB4活細胞數(shù)，計算生長抑制率；Wright's-Giemsa染色計數(shù)法和NBT還原試驗測定細胞分化率，透射電鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)變化；流式細胞術(shù)

2、檢測CD11b/CD33表達情況，Annexin V法測定細胞凋亡率。 結(jié)果：⑴使用大孔樹脂法純化威靈仙總皂苷，精密性試驗和重現(xiàn)性試驗的RSD分別為0.85％和1.35％：威靈仙總皂苷主要富集于70％乙醇洗脫液部分，總皂苷含量達23.14±0.12％，其回收率達到4.55％，其RSD為0.89％。⑵威靈仙總皂苷對NB4細胞有明顯的生長抑制作用，且具有劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系；在本實驗條件下，威靈仙總皂苷對NB4細胞無明顯的誘導(dǎo)分化作用