分化型甲狀腺癌患者NIS基因突變的研究.pdf

1、目的：
　　甲狀腺癌近年來(lái)發(fā)病率增長(zhǎng)迅速，已成為增長(zhǎng)較快的實(shí)體腫瘤之一，分化型甲狀腺癌（differentiated thyroid carcinomas，DTC）占甲狀腺癌（thyroid carcinomas，TC）的85-90%，而且分化型甲狀腺癌的增長(zhǎng)速度占甲狀腺癌增速的絕大部分。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，甲狀腺癌在分子水平的研究日益受到人們的重視，研究發(fā)現(xiàn)甲狀腺癌與Braf基因突變、Ret/PTC重組、Ras點(diǎn)突變、PAX8

2、/PPARγ基因重組以及Na+/I-Symporter(NIS)基因突變具有一定關(guān)系。NIS基因在甲狀腺攝碘功能中起著關(guān)鍵作用，在甲狀腺癌分化過(guò)程中，可能由于其去分化作用引起NIS基因突變，導(dǎo)致攝碘功能喪失，在放射碘治療療效較差方面起到一定的作用。本試驗(yàn)擬在研究并分析分化型甲狀腺癌患者 NIS基因突變的類型和特點(diǎn)，并對(duì)其基因類型-表現(xiàn)型的關(guān)系進(jìn)行初步探討，為 DTC患者的基因診斷和基因治療及預(yù)后分析提供一定的理論依據(jù)。
　　方法：

3、
　　按照僅有甲狀腺腫瘤病史，無(wú)其他惡性腫瘤病史，術(shù)前未行甲狀腺放射治療及相關(guān)治療的選擇標(biāo)準(zhǔn)，選取于2016.04-2016.07在青島大學(xué)附屬醫(yī)院行甲狀腺癌手術(shù)治療，并經(jīng)兩位病理醫(yī)師確認(rèn)的100例 DTC患者作為研究對(duì)象，從患者癌組織及正常組織中提取基因組 DNA，采用PCR擴(kuò)增和直接測(cè)序的方法對(duì) NIS基因全部外顯子及一部分臨近內(nèi)含子進(jìn)行基因突變的檢測(cè)。通過(guò)卡方檢驗(yàn)對(duì)檢測(cè)到的基因突變的頻率進(jìn)行分析，p<0.5為癌組織組和正常組

4、織組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)生物信息學(xué)對(duì)所得到的基因突變進(jìn)行基因突變位點(diǎn)危險(xiǎn)性分析。
　　結(jié)果：
　　在1例患者中發(fā)現(xiàn)位于NIS基因第14外顯子的一個(gè)錯(cuò)義突變（c.1663C＞T,p.Arg555Cys）位點(diǎn)，在2例患者癌組織中發(fā)現(xiàn)位于 NIS基因第10外顯子的一個(gè)同義基因突變（c.1571 C＞T, p.Leu408=）位點(diǎn)，在1例患者中發(fā)現(xiàn)位于NIS基因第8外顯子發(fā)現(xiàn)一個(gè)同義基因突變（c.1224C＞T,p.Leu

5、408=）位點(diǎn)。在編號(hào)9、13、27、35、41、42的癌組織第1內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個(gè)SNP：rs740695（c.-1207C＞T）位點(diǎn)；在編號(hào)1號(hào)的患者癌組織第5內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個(gè)SNP突變位點(diǎn)
　　rs185045651(c.332+52G＞A)；在編號(hào)4、18、46、61、89患者癌組織第6內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個(gè)SNP突變位點(diǎn)rs182064161(c.839+11C＞T)；在編號(hào)10、23、24、58患者癌組織第14內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個(gè)SNP突

6、變位點(diǎn)rs148626179(c.1767+23A＞C)；在編號(hào)31、86號(hào)患者癌組織第14內(nèi)含子同時(shí)發(fā)現(xiàn)一個(gè)SNP位點(diǎn)rs4808709(1767+29A＞G)。其他癌組織及全部正常組織中未發(fā)現(xiàn)基因突變。兩組組織經(jīng)卡方檢驗(yàn)（P＞0.05）比較，基因突變頻率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　在統(tǒng)計(jì)學(xué)方面，癌組織組與正常組織基因突變頻率經(jīng)卡方檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在生物信息學(xué)方面，通過(guò)運(yùn)用polyphen-2程序?qū)Πl(fā)現(xiàn)的錯(cuò)

7、義突變（c.1663C＞T,p.Arg555Cys）進(jìn)行危險(xiǎn)度分析，運(yùn)算值為1，運(yùn)用SIFT評(píng)分，分值為0分，提示該突變對(duì)于NIS基因所編碼的NIS蛋白具有較大危險(xiǎn)性。該患者是一個(gè)51歲的老年女性，術(shù)后病理示甲狀腺乳頭狀癌，腫瘤直徑0.7 cm，有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，癌灶呈多灶性，甲功五項(xiàng)未見(jiàn)明顯異常，基因型和表型關(guān)系仍不明顯。NIS基因突變可能與青島地區(qū)分化型甲狀腺癌的相關(guān)性不明顯，該錯(cuò)義突變?cè)诩谞钕贁z碘過(guò)程中可能起到一定作用，具體功能仍