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文檔簡介
1、目的:研究Nrf2-ARE通路在腦缺血再灌注的作用,并觀察丙酮酸乙酯對腦缺血再灌注后Nrf2-ARE通路、神經元線粒體的作用,探討丙酮酸乙酯對腦缺血再灌注后短期認知功能的保護作用。
方法:66只SD大鼠隨機分為三組,三組為假手術組、丙酮酸乙酯組以及缺血再灌注組,每組22只,其中的缺血再灌組和丙酮酸乙酯組直接采用二血管阻斷法建造腦組織缺血再灌注的大鼠模型;假手術組的大鼠采取雙側的頸總動脈鈍性游離分開,但不進行血管的夾閉操作。丙酮
2、酸乙酯組于恢復血流即刻進行腹腔注射丙酮酸乙酯,其余兩組給予等量生理鹽水,應用水迷宮實驗對三組大鼠進行行為學測試,評估認知功能;采用RT-PCR檢測三組大鼠海馬神經組織中Nrf2、HO-1、γ-GCS、NQO1的mRNA表達;采用電鏡觀察三組海馬神經細胞內超微結構、線粒體的改變。
結果:(1)造模前,三組的水迷宮測試成績,包括逃避潛伏期、穿環(huán)次數及T象限游泳距離百分比相比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。大鼠造模結束后第4、
3、7天水迷宮測試成績,丙酮酸乙酯組以及缺血再灌注組兩組的逃避潛伏期明顯長于假手術組,而大鼠的穿環(huán)次數和T象限游泳距離百分比明顯比假手術組減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);丙酮酸乙酯組大鼠的逃避潛伏期顯著短于缺血再灌注組,而大鼠的穿環(huán)次數以及T象限游泳距離百分比顯著高于缺血再灌注組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)丙酮酸乙酯組以及缺血再灌注組的Nrf2mRNA、HO-1 mRNA、γ-GCSmRNA、NQO1mRNA的含量
4、比假手術組顯著升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);丙酮酸乙酯組的Nrf2mRNA、HO-1mRNA、γ-GCSmRNA、NQO1mRNA含量高于缺血再灌注組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(3)海馬神經細胞透射電鏡結果可見,假手術組:神經細胞的形態(tài)較為規(guī)則,大量線粒體分布在細胞質內,清晰整齊的內嵴,分布在內質網內,核糖體聚集附在上面,核膜較為完好,可清晰見到核仁、染色質,電子透明度顯示較高。缺血再灌注組:神經細胞形態(tài)發(fā)生改變
5、,外形顯示不規(guī)則,線粒體出現(xiàn)內嵴損傷、裂斷,大量的變性空泡存在,核糖體發(fā)生脫落,可見高電子密度的顆粒分布在細胞質內,核膜破裂,染色質聚集而不均勻。丙酮酸乙酯組:神經細胞的微結構損傷比缺血再灌注組輕,只有少部分的線粒體破壞,變性空泡較少,內質網的形態(tài)破壞較少,仍可見核仁,細胞質內存在少量顆粒,其中有少量染色質聚集。
結論:(1)丙酮酸乙酯能夠改善腦缺血再灌注后空間學習以及記憶能力。(2)丙酮酸乙酯通過提高Nrf2-ARE通路的基
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