TET蛋白非酶催化的新功能：負(fù)性調(diào)控神經(jīng)元早期分化的研究.pdf

1、申請(qǐng)上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文TET蛋白非酶催化的新功能蛋白非酶催化的新功能:負(fù)性調(diào)控神經(jīng)元早期分化的研究負(fù)性調(diào)控神經(jīng)元早期分化的研究專業(yè)：專業(yè)：生物學(xué)碩士生：碩士生：高潔導(dǎo)師：導(dǎo)師：金衛(wèi)林副研究員資助基金項(xiàng)目國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31171033和No.81272801)上海交通大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院上海交通大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院2016年6月上海交通大學(xué)碩士畢業(yè)論文iTET蛋白非酶催化的新功能:負(fù)性調(diào)控神經(jīng)元早期分化的研究摘要TET蛋白

2、非酶催化的新功能:負(fù)性調(diào)控神經(jīng)元早期分化的研究摘要DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學(xué)修飾，在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、個(gè)體發(fā)育等方面起重要作用。在細(xì)胞內(nèi)DNA存在著甲基化和去甲基化的動(dòng)態(tài)過程，這一過程影響著大腦的功能，而異常的甲基化水平則會(huì)引起許多神經(jīng)系統(tǒng)疾病。TET(Teneleventranslocation)蛋白家族是DNA主動(dòng)去甲基化過程中的關(guān)鍵蛋白。其包括TET1、TET2和TET3三個(gè)成員，是一類依賴于Fe(II)和α酮戊二酸(α

3、ketoglutarateαKG)的雙加氧酶，能夠催化DNA上的5mC氧化成為5hmC，并進(jìn)一步的氧化成為5fC和5caC。而5hmC也是一個(gè)重要的表觀遺傳學(xué)標(biāo)記物，能夠調(diào)控在神經(jīng)發(fā)育和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的形成。TET蛋白在胚胎發(fā)育，免疫調(diào)節(jié)以及癌癥發(fā)生等方面均具有重要作用，同時(shí)也能夠調(diào)控早期神經(jīng)元分化，神經(jīng)再生和記憶形成，然而其在神經(jīng)分化中的作用并不十分清楚。本研究以Neuro2a細(xì)胞作為研究模型，一方面探索了TET蛋白在神經(jīng)分化過程中所發(fā)

4、揮的作用，另一方面也為成神經(jīng)母細(xì)胞瘤的分化治療尋找可能的方案。首先，利用免疫熒光染色，qRTPCR，Dotblot等方法檢測(cè)到，在Neuro2a細(xì)胞中，有較高的TET蛋白存在，但是TET蛋白的催化產(chǎn)物5hmC水平卻維持在了一個(gè)相對(duì)較低的水平。TET蛋白和5hmC含量的不匹配提示，在Neuro2a細(xì)胞中TET蛋白催化活性可能受到了抑制。其次，利用RNA干擾，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染等方法，敲減了細(xì)胞中TET蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Neuro2a的細(xì)胞分化率明顯的