Ang--(1-7)和A779通過(guò)G蛋白偶聯(lián)受體MAS對(duì)體外培養(yǎng)的人肝癌HUH-7細(xì)胞的作用效果研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?探討Ang-(1-7)與A779通過(guò)G蛋白偶聯(lián)受體Mas對(duì)體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞株Huh-7增殖凋亡及細(xì)胞周期的影響。檢測(cè)Ang(1-7)和A779分別作用于體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)胞后，人肝癌細(xì)胞株Huh-7中Mas的表達(dá)情況。探討Ang-(1-7)和A779通過(guò)G蛋白偶聯(lián)受體Mas對(duì)體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞株Huh-7遷移能力的影響。探討Ang-(1-7)和A779通過(guò)G蛋白偶聯(lián)受體Mas可能在人肝癌細(xì)胞Huh-7中所發(fā)揮的

2、作用。
　　實(shí)驗(yàn)方法:(1)運(yùn)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法，檢測(cè)藥物作用于體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)胞后，細(xì)胞中Mas表達(dá)情況。(2)運(yùn)用流式細(xì)胞儀，檢測(cè)藥物作用于體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7后，細(xì)胞的增殖凋亡和細(xì)胞周期變化情況。(3)運(yùn)用劃痕愈合法和Transwell法，檢測(cè)藥物作用于體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7后，細(xì)胞的遷移能力變化情況。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1) Ang-(1-7)和A779分別作用于體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)

3、胞后，未引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞形態(tài)以及細(xì)胞排列方式發(fā)生明顯變化。(2) Ang(1-7)和A779分別作用于體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)胞后，Ang(1-7)組與對(duì)照組相比細(xì)胞凋亡增多，A779組與對(duì)照組相比細(xì)胞凋亡減少。Ang(1-7)組、A779組和對(duì)照組的凋亡率分別為95.2％、30.2％和42.7％。Ang(1-7)組明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，A779組低于對(duì)照組(P＜0.05)。(3) RT-PCR: Ang(1-7)組、A

4、779組和對(duì)照組中Mas相對(duì)表達(dá)量依次為2.735、0.498和1，Ang(1-7)組高于對(duì)照組，A779組低于對(duì)照組，差別均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(4)在本研究中，藥物Ang-(1-7)和藥物A779對(duì)體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)胞周期的影響不明顯。(5)劃痕愈合實(shí)驗(yàn)測(cè)得Ang(1-7)組、A779組和對(duì)照組的劃痕愈合率分別是9.70％、22.27％和20.74％。Ang(1-7)組與對(duì)照組相比明顯低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義(P＜0.05)。(6)Transwell法測(cè)得Ang-(1-7)組、A779組和對(duì)照組的細(xì)胞計(jì)數(shù)分別是247、370和385。Ang(1-7)組與對(duì)照組相比明顯低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)論:(1) Ang-(1-7)通過(guò)G蛋白偶聯(lián)受體Mas能促進(jìn)體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)胞的凋亡，抑制體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)胞的增殖。A779通過(guò)G蛋白偶聯(lián)受體Mas能抑制體外培養(yǎng)的人肝癌Huh-7細(xì)胞