羥基紅花黃素A延緩IL-1β誘導(dǎo)軟骨終板細(xì)胞退變的作用機(jī)制.pdf

1、目的及意義椎間盤(pán)退變性疾?。ㄈ珙i椎?。┑牟±硎亲甸g盤(pán)退變。該類(lèi)疾病患病率逐年上升，發(fā)病年齡日趨年輕，嚴(yán)重影響著患者生活質(zhì)量，成為公認(rèn)的難治性疾病。減少軟骨終板損傷對(duì)防止椎間盤(pán)退變至關(guān)重要。保護(hù)軟骨終細(xì)胞對(duì)預(yù)防和治療椎間盤(pán)退變性疾病有重要意義。
　　 紅花提取物為主的注射液對(duì)治療骨性關(guān)節(jié)炎，滑膜炎及頸椎病等效果較好。羥基紅花黃素A(HydroxysaffloweryellowA，HSYA)是中藥紅花的主要活性成分，具有廣泛的藥理作

2、用。前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示HSYA可能存在延緩椎間盤(pán)退變潛能。本實(shí)驗(yàn)在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討HSYA對(duì)炎癥誘導(dǎo)的椎間盤(pán)軟骨終板細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制，對(duì)新藥開(kāi)發(fā)，藥物新適應(yīng)癥的擴(kuò)展具有重要意義。方法以10ng/mlIL-1β誘導(dǎo)正常小鼠軟骨終板細(xì)胞建立炎癥退變細(xì)胞模型，并通過(guò)細(xì)胞化學(xué)染色，細(xì)胞免疫熒光，透射電鏡觀察、cck-8細(xì)胞增殖檢測(cè)法、流式細(xì)胞儀分析、Real-timeRT-PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)以及westernblot檢測(cè)蛋白表達(dá)等實(shí)驗(yàn)方法研

3、究HSYA的具體作用機(jī)制。
　　 結(jié)果實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)10ng/mlIL-1β誘導(dǎo)軟骨終板細(xì)胞炎癥退變;不同濃度的HSYA均能拮抗IL-1β的抑制軟骨細(xì)胞增殖作用，并能促進(jìn)軟骨終板細(xì)胞的增殖，HSYA10-5mol/L給藥組作用最顯著;HSYA可以拮抗誘導(dǎo)細(xì)胞上調(diào)BaxmRNA及蛋白表達(dá)，下調(diào)Bcl-2mRNA及蛋白表達(dá)的作用;HSYA能夠維持IL-1β誘導(dǎo)軟骨終板細(xì)胞正常形態(tài)、降低細(xì)胞肥大比例;HSYA能降低誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥因子IL-1

4、β、TNF-α、IL-6、iNOsmRNA表達(dá);HSYA可降低誘導(dǎo)軟骨終板細(xì)胞、MMP-1胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)，增加colⅡ、aggrecan、TIMP-1胞質(zhì)內(nèi)表達(dá);同時(shí)能降低誘導(dǎo)細(xì)胞colX、MMP-1、MMP-13mRNA表達(dá)，增加colⅡ，aggrecan表達(dá);對(duì)TIMP-1調(diào)節(jié)具有雙向性，在退變?cè)缙诮档驼T導(dǎo)細(xì)胞TIMP-1mRNA表達(dá)，在后期則增加其表達(dá)。
　　 結(jié)論IL-1β可誘導(dǎo)原代小鼠椎間盤(pán)軟骨終板細(xì)胞發(fā)生退變;HSYA能