白藜蘆醇對(duì)缺氧誘導(dǎo)的人胃癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響的初步研究.pdf

1、目的：
　　上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮細(xì)胞在某些特定的生理和病理狀態(tài)下向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象，腫瘤細(xì)胞發(fā)生侵襲和遷移的主要機(jī)制之一即細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的因素有很多，缺氧也被認(rèn)為是其中重要的誘導(dǎo)因素之一。白藜蘆醇（resveratrol)是一種從葡萄中提取發(fā)現(xiàn)，后來(lái)被證實(shí)廣泛存在于各種植物中的植物補(bǔ)體，有研究表明，白藜蘆醇可以通過(guò)抑制細(xì)

2、胞中缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1α（hypoxia inducible factor-1α）的累積來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化從而抑制腫瘤的侵襲和遷移，但在胃癌細(xì)胞中目前還沒(méi)有相關(guān)的研究報(bào)道。本研究旨在通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探討白藜蘆醇對(duì)缺氧誘導(dǎo)的人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移的影響。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞，通過(guò)使用100μmol/L的CoCl2作用于細(xì)胞建立缺氧模型

3、后，采用噻唑藍(lán)（MTT）比色法試驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的白藜蘆醇對(duì)人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞的增殖抑制情況，并分別計(jì)算出白藜蘆醇對(duì)兩種細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50值)；采用細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞遷移能力的影響情況；采用qPCR及Western blotting方法檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞中HIF-1α、Snail及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)標(biāo)志因子E-cadhe

4、rin和Vimentin mRNA和蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　MTT結(jié)果顯示白藜蘆醇作用于正常和缺氧狀態(tài)下的人胃癌 BGC-823和SGC-7901細(xì)胞24 h的 IC50值分別為43.90±2.29μmol/L、40.57±1.83μmol/L和48.31±1.76μmol/L、42.69±2.04μmol/L。白藜蘆醇對(duì)常氧和缺氧狀態(tài)下的人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞的增殖均有明顯的抑制作用，且在一定

5、濃度范圍內(nèi)，隨著濃度的增加抑制作用逐漸加強(qiáng)；細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示白藜蘆醇能夠明顯減緩正常和缺氧狀態(tài)下人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞的遷移能力；qPCR及Western blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示白藜蘆醇可顯著抑制人胃癌BGC-823和SGC-7901細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)的HIF-1α蛋白的積累而對(duì)HIF-1α mRNA的表達(dá)無(wú)影響。此外，白藜蘆醇可以抑制缺氧誘導(dǎo)的HIF-1α的積累引起人胃癌BGC-823和 SGC-7901細(xì)胞