慢性輕度應(yīng)激不敏感大鼠海馬突觸活性區(qū)分子的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的：應(yīng)激性事件通常被認(rèn)為是抑郁癥的主要促發(fā)因素，但在日常生活中有部分人群即使飽受壓抑仍可保持正常心理狀態(tài)，導(dǎo)致該現(xiàn)象發(fā)生的分子機(jī)制目前尚不清晰。眾多研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥存在海馬神經(jīng)突觸可塑性和遞質(zhì)傳遞的紊亂，已成為各種抑郁癥發(fā)生發(fā)展的最終共同途徑，而這在應(yīng)激抵抗分子機(jī)制研究中所體現(xiàn)的適應(yīng)性變化也需深入分析。
　　方法：首先使用一種慢性溫和應(yīng)激(CMS)方案得到了正常、應(yīng)激敏感和應(yīng)激抵抗三個(gè)組別大鼠，然后利用穩(wěn)定同位素標(biāo)記的相對(duì)和絕對(duì)定

2、量(iTRAQ)技術(shù)結(jié)合二維液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)各組大鼠海馬突觸連接的蛋白質(zhì)組進(jìn)行了定量分析。差異蛋白質(zhì)的突觸定位和功能分析后，選取感興趣蛋白質(zhì)進(jìn)行了免疫印跡(Immumoblotting)分析。
　　結(jié)果：通過(guò)基于ITRAQ標(biāo)記的定量分析，4318個(gè)蛋白質(zhì)被量化，其中有89個(gè)為差異膜蛋白。通過(guò) SynaptomeDB突觸定位搜尋，我們發(fā)現(xiàn)81(91％)個(gè)有預(yù)測(cè)的突觸定位。該蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)了一系列候選突觸膜蛋白質(zhì)，可能與應(yīng)激敏感

3、性有密切關(guān)系。后續(xù)功能分析顯示，涉及突觸膜轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白質(zhì)系統(tǒng)在突觸前活性區(qū)域表現(xiàn)出顯著差異，是潛在的分子適應(yīng)性機(jī)制。通過(guò) STRING和免疫印跡分析，在應(yīng)激不敏感大鼠海馬突觸前活性區(qū)中膜相關(guān) Rab3a-GTP和 Munc18-1共調(diào)節(jié)syntaxin-1/SNAP25/VAMP2復(fù)合物的組裝，促進(jìn)SNARE調(diào)節(jié)的膜融合和神經(jīng)遞質(zhì)釋放，可能是應(yīng)激保護(hù)機(jī)制的一部分，從而積極維護(hù)一個(gè)情感的體內(nèi)平衡，是潛在的抗抑郁新機(jī)制。
　　結(jié)論：揭示