長鏈非編碼RNA DBCCR1-003在膀胱癌中介導DNMT1調控DBCCR1的表達.pdf

1、近些年來，一類長度超過200個核苷酸的長鏈非編碼RNA（lncRNA）開始受到人們的關注。DBCCR1-003作為一個來源于抑癌基因DBCCR1(膀胱癌染色體缺失候選區(qū)域1)的lncRNA，其功能尚不明確。
　　目的：
　　研究DBCCR1-003在膀胱癌中的功能及其作用的分子機制。
　　方法：
　　首先，我們將在分別在細胞水平和組織水平檢測DBCCR1-003、DBCCR1和DNMT1(DNA甲基化轉移酶1)的

2、表達水平和DBCCR1啟動子的甲基化水平。之后，通過在膀胱癌細胞T24中過表達DBCCR1-003，檢測其對DBCCR1和DNMT1的表達水平和DBCCR1甲基化水平的影響，并通過染色質免疫沉淀（ChIP）和RNA免疫沉淀（RIP）檢測它們之間的聯(lián)系。最后，通過細胞增殖、集落形成、細胞凋亡和細胞周期揭示DBCCR1-003對膀胱癌的影響。
　　結果：
　　在膀胱癌細胞與膀胱癌組織中，DBCCR1-003與DBCCR1均為低表

3、達，而DNMT1為高表達，DBCCR1為甲基化。在T24中過表達DBCCR1-003能通過逆轉DBCCR1啟動子甲基化水平和DNMT1結合至DBCCR1啟動子從而導致DBCCR1表達水平的增高。此外，RIP表明DBCCR1-003能與DNMT1直接結合，并且這種結合會因為DBCCR1甲基化水平的降低而增加，表明DBCCR1-003可能通過與DNMT1結合從而抑制DNMT1所調控的DBCCR1甲基化。結果還表明：過表達DBCCR1-003