長(zhǎng)鏈非編碼RNA NONHSAT070806在膀胱癌中的表達(dá)水平及功能研究.pdf

1、背景:膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的腫瘤，在其發(fā)生發(fā)展過程中，腫瘤侵襲起著重要的作用，根據(jù)腫瘤侵襲程度的不同，膀胱癌又被分為非肌層浸潤(rùn)型膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer，NMIBC)及肌層浸潤(rùn)型(muscle invasive bladdercancer，MIBC)，其中，MIBC惡性程度高，復(fù)發(fā)率高，預(yù)后較差，死亡率明顯高于NMIBC。近年來，雖然相關(guān)診療手段有了較大提高，但臨床確診膀胱癌仍然依靠

2、有創(chuàng)性的膀胱鏡檢，這對(duì)早起篩查膀胱癌造成了不利影響，因此，深入探討研究膀胱癌病因?qū)W相關(guān)機(jī)制，具有重要的臨床意義。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(Long-noncodingRNA，LncRNA)是一類長(zhǎng)度超過200個(gè)nt，但沒有編碼蛋白質(zhì)的一類RNA，占人體RNA總數(shù)的80％以上，LncRNA與腫瘤的相關(guān)研究是近年來的熱點(diǎn)，包括多種LncRNA被認(rèn)為在胃癌、前列腺癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等惡性腫瘤中表達(dá)水平發(fā)生顯著改變，但缺乏相關(guān)機(jī)制研究。
　

3、　方法:通過基因芯片對(duì)膀胱癌及癌旁組織差異表達(dá)的LncRNA進(jìn)行分析，選取其中表達(dá)差異顯著的LncRNA，利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)(qPCR)進(jìn)一步篩選，接著在34例患者中進(jìn)行驗(yàn)證，在此基礎(chǔ)上對(duì)LncRNA表達(dá)水平與膀胱癌患者臨床指標(biāo)進(jìn)行關(guān)聯(lián)性分析。構(gòu)建過表達(dá)NONHSAT070806載體，將其瞬時(shí)轉(zhuǎn)染入膀胱癌細(xì)胞T24和5637中，檢測(cè)細(xì)胞過表達(dá)NONHSAT070806后凋亡、增殖、侵襲、遷移和克隆形成能力的變化，探討NONHSAT0

4、70806在體外對(duì)膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。更進(jìn)一步，將轉(zhuǎn)染NONSHAT070806過表達(dá)載體和對(duì)照空白載體的5637細(xì)胞注射入裸鼠皮下，構(gòu)建裸鼠成瘤模型，通過測(cè)量瘤體體積和重量，分析NONHSAT070806對(duì)膀胱癌細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力的影響。
　　結(jié)果:發(fā)現(xiàn)正義鏈長(zhǎng)鏈非編碼RNA NONHSAT070806在大部分患者膀胱癌組織中表達(dá)水平下降(24/34，70.6％)，且其表達(dá)水平與患者腫瘤侵襲程度呈負(fù)相關(guān)(p＜0.05)，而

5、與其他臨床指標(biāo)，如年齡、性別、吸煙史無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，NONHSAT070806過表達(dá)后，可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和細(xì)胞克隆形成能力(p＜0.05)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣表明，NONHSAT070806過表達(dá)可以在體內(nèi)抑制膀胱癌細(xì)胞威瘤能力(p＜0.05)。
　　結(jié)論:NONHSAT070806在膀胱癌中低表達(dá)，且其表達(dá)水平與腫瘤侵襲有關(guān)，其可能通過抑制膀胱癌侵襲發(fā)揮其抑癌作用，下一步關(guān)于其作用靶