溫性經(jīng)筋通貼膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高及體外透皮性能研究.pdf

1、目的:
　　1.建立溫性經(jīng)筋通貼膏的薄層鑒別方法，完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　2.建立溫性經(jīng)筋通貼膏中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿含量測定方法，進(jìn)一步提高質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，同時為溫性經(jīng)筋通貼膏的體外釋放及透皮性能奠定含量測定方法基礎(chǔ)。
　　3.對溫性經(jīng)筋通貼膏中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿從基質(zhì)骨架材料釋放的特性進(jìn)行研究。
　　4.對溫性經(jīng)筋通貼膏中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿透皮特性進(jìn)行研究。
　　5.制

2、備缺冰片、氮酮的溫性經(jīng)筋通貼膏，研究處方中冰片、氮酮對補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿透皮性能產(chǎn)生的影響。
　　方法與結(jié)果:
　　1.通過參考《中國藥典》（2010年版）和成方制劑的鑒別方法，我們對溫性經(jīng)筋通貼膏處方藥味的薄層鑒別方法進(jìn)行了研究，經(jīng)過反復(fù)試驗和堅持不懈的探索，最終建立了方中補(bǔ)骨脂、關(guān)黃柏、冰片、大黃、黃芪的薄層鑒別方法，方中其他藥味由于陰性存在干擾或者方法耐用性能欠佳，未能確定薄層鑒別方法。
　　2.采

3、用雙波長HPLC法，通過反復(fù)實驗，我們建立了同時測定補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿的HPLC方法:采用Inertsil ODS-SP C18柱(4.6mm×150mm，5μ m)色譜柱;以乙腈-0.1％磷酸溶液(25∶75)為流動相;流速為1.0 mL/min;柱溫為30℃;進(jìn)樣量10μL;檢測波長為246nm（補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素）、345nm（鹽酸小檗堿）。結(jié)果顯示，溫性經(jīng)筋通貼膏含量測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗

4、堿均在0.8-48μ g/mL的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程分別為:(Y)=72355.0X+28120.0(r=0.9995),(Y)=78893.4X+12795.2(r=0.9999),(Y)=39918.4X+4128.01(r=0.9999);接收液含量測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿均在0.05-6.0μg/mL的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程分別為:(Y)=78608.6X-301.617(r=0.9999)

5、，(Y)=84889.7X+161.986(r=0.9999)，(Y)=43611.3X-1363.93(r=0.9999)，平均回收率分別為101.80％(RSD=2.84％),100.61％(RSD=3.84％),99.12％(RSD=3.67％)。
　　3.根據(jù)被測成分的性質(zhì)對溫性經(jīng)筋通貼膏體外釋放和透皮實驗所用的接收液種類進(jìn)行了篩選，采用直立式Franz改良擴(kuò)散池，以貼膏膏體面直接接觸接收液的方式，通過測定不同時間點接收液

6、內(nèi)成分的含量，計算24h累積透過百分率，以Higuchi方程的擬合度（相關(guān)系數(shù)）為指標(biāo)，選取擬合度最佳的接收液種類。結(jié)果表明，含20％乙醇的生理鹽水樣品的擬合度最高，釋放速率也相對較高，定為溫性經(jīng)筋通貼膏體外釋放和透皮研究的接收液。其中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿的24h累積釋放率分別為:47.58％，44.14％，31.64％;平均釋放速率分別為:10.7309μ g·cm-2·h-1，6.5292μg·cm-2· h-1,7.2

7、532μ g·cm-2· h-1。
　　4.參照體外釋放實驗，采用健康SD大鼠腹部皮膚作為透過皮膚，計算24h累積透過百分率，將不同時間點的透過率與時間進(jìn)行Higuchi方程擬合，求得透皮速率。結(jié)果顯示，補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素透過實驗皮膚的24h累積透過率分別為:6.83％，3.81％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于其24h累積釋放率;平均透皮速率分別為:1.8674μ g·cm-2·h-1，0.6959μg·cm-2·h-1，亦遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于它們的24h累積

8、釋放率。在各個時間點的透皮接收液中，均未檢測出鹽酸小檗堿。
　　5.按照溫性經(jīng)筋通貼膏處方，分別制備缺冰片和氮酮的溫性經(jīng)筋通貼膏、缺冰片的溫性經(jīng)筋通貼膏、缺氮酮的溫性經(jīng)筋通貼膏，再參照溫性經(jīng)筋通貼膏透皮實驗方法，考察缺冰片和氮酮的溫性貼膏中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素24h累積透過百分率，并與含有處方量冰片和氮酮的溫性經(jīng)筋通貼膏相比，明確冰片和氮酮對它們透皮行為產(chǎn)生的影響。結(jié)果顯示，在缺冰片和氮酮的貼膏中，補(bǔ)骨脂素的24 h累計透過百分率

9、為0.92％，平均透皮速率是0.2483μ g·cm-2·h-1，比溫性經(jīng)筋通貼膏的補(bǔ)骨脂素的透皮速率減少43.22倍;在缺冰片的貼膏中，補(bǔ)骨脂素的24 h累計透過百分率為1.13％，平均透皮速率是0.3006μ g·cm-2·h-1，比溫性經(jīng)筋通貼膏的補(bǔ)骨脂素的透皮速率減少35.70倍;在缺氮酮的貼膏中，補(bǔ)骨脂素的24 h累計透過百分率為0.96％，平均透皮速率是0.2681μg·cm-2·h-1，比溫性經(jīng)筋通貼膏的補(bǔ)骨脂素的透皮速率

10、減少40.03倍，在缺冰片或者氮酮的溫性經(jīng)筋通貼膏透皮接收液中均未檢測出異補(bǔ)骨脂素。
　　結(jié)論:
　　1.本次研究建立的方中補(bǔ)骨脂、關(guān)黃柏、冰片、大黃、黃芪的薄層鑒別方法操作簡便、專屬性好，穩(wěn)定性強(qiáng)，可用于溫性經(jīng)筋通貼膏的質(zhì)量控制，建議列入該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。
　　2.我們建立的可同時測定補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿的HPLC方法，具有穩(wěn)定、可靠、結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好等優(yōu)點，可用于溫性經(jīng)筋通貼膏的含量控制，建議納入該

11、制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　3.20％乙醇的生理鹽水樣品的擬合度最高，釋放速率也相對較高，選作為接收液。通過溫性經(jīng)筋通貼膏體外釋放的實驗研究，我們得知補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、鹽酸小檗堿均具有良好的自骨架釋放至接收液的性能，24h累積釋放率均在31.64％以上。
　　4.透皮實驗中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素透過實驗皮膚的24h累積透過率為6.83％和3.81％，明顯小于24h累積釋放率，說明皮膚是經(jīng)皮給藥制劑進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮療效的主要障礙。在透皮

12、接收液中，未能檢測出鹽酸小檗堿，可能也與其理化性質(zhì)有關(guān)，也或者由于該成分與皮膚親和力較低所致。
　　5.通過對缺冰片、氮酮的溫性經(jīng)筋通貼膏的透皮研究，我們發(fā)現(xiàn)，含有處方量冰片和氮酮貼膏比缺冰片和氮酮貼膏中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的透皮速度和程度明顯增加，說明冰片和氮酮對補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素有明顯的透皮促滲作用。鹽酸小檗堿的24h累積釋放率已達(dá)到31.64％，但在透皮實驗中未能檢測到鹽酸小檗堿，說明冰片和氮酮對鹽酸小檗堿未能產(chǎn)生與補(bǔ)骨脂