CTHRC1對胃腸道間質(zhì)瘤及其血管生成的作用.pdf

1、目的：研究CTHRC1在胃腸道間質(zhì)瘤中高表達(dá)的機(jī)制、CTHC1對GIST-T1細(xì)胞的作用及機(jī)制、CTHRC1對腫瘤血管的作用及機(jī)制。
　　方法：1）我們通過對間質(zhì)瘤的組織芯片行免疫組化染色，分析 TGF-β1與 CTHRC1在GIST中表達(dá)的相關(guān)性;2）通過給予GIST-T1重組的TGF-β1后CTHRC1的mRNA和蛋白的表達(dá)情況；3）使用siRNA敲除GIS-T1中的SMAD2，研究CTHRC1的mRNA表達(dá)情況；4）通過腺病

2、毒過表達(dá)和siRNA沉默GIST-T1細(xì)胞中的CTHRC1后，研究GIST-T1的侵襲和遷移能力的變化；5）使用腺病毒過表達(dá)和 siRNA敲除 GIST-T1細(xì)胞中的CTHRC1后，通過Western Blot和PCR的方法檢測其下游基因的mRNA和蛋白水平的變化；6）使用siRNA敲除GIST-T1中的Snail后，研究其侵襲和遷移能力的變化；7）使用腺病毒過表達(dá)和siRNA敲除HUEVC中的CTHRC1后，研究其對內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和小

3、管形成能力的影響；8）使用U0126及SP600125抑制HUVEC中的ERK及JNK的活性后，研究其對內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和小管形成能力的影響。
　　結(jié)果：1）GIST組織芯片的免疫組化結(jié)果顯示，TGF-β1與CTHRC1的蛋白表達(dá)具有相關(guān)性；2）TGF-β1可促進(jìn)CTHRC1的mRNA和蛋白表達(dá)；3）敲除SMAD2后，GIST-T1細(xì)胞的CHRC1表達(dá)下降；4）過表達(dá)CTHRC1后，GIST-T1的侵襲和遷移能力增強(qiáng)，敲除CTHRC

4、1則會起到相反作用；5）過表達(dá)GIST-T1中的CTHRC1后，Snail、N-CAD的mRNA和蛋白表達(dá)增加，E-CAD的mRNA和蛋白表達(dá)下降，敲除GIST-T1中的CTHRC1后，則結(jié)果相反；6）敲除GIST-T1中的Snail后，GIST-T1的侵襲和遷移能力減弱；7）過表達(dá)HUEVC的CTHRC1后，其遷移和成小管能力增加，敲除CTHRC1則起到相反作用；8）U0126及SP600125可使HUEVC細(xì)胞的遷移和成小管能力降低