曲美他嗪對(duì)兔快速心房起搏房顫模型心肌細(xì)胞能量代謝的影響.pdf

1、目的:心房顫動(dòng)(atrial fibrillation，AF)，簡(jiǎn)稱房顫，在臨床上是一種最常見(jiàn)的心律失常。房顫常使患者感覺(jué)心悸、胸悶、氣短等不適，更甚者會(huì)出現(xiàn)腦卒中、心力衰竭等并發(fā)癥。我國(guó)老齡化問(wèn)題日趨嚴(yán)峻，心血管疾病發(fā)病率也在不斷攀升，導(dǎo)致心房顫動(dòng)對(duì)社會(huì)及家庭帶來(lái)的負(fù)擔(dān)越來(lái)越重。房顫的發(fā)生發(fā)展機(jī)制極其復(fù)雜，使得房顫的治療不能盡如人意。既往研究發(fā)現(xiàn)，房顫時(shí)心肌會(huì)發(fā)生能量代謝的改變，于是通過(guò)能量代謝的調(diào)節(jié)干預(yù)房顫的治療越來(lái)越受到人們的關(guān)注

2、。曲美他嗪作為能量代謝的藥物目前主要用于治療缺血性心臟病。然而，臨床研究和實(shí)驗(yàn)研究都提示曲美他嗪對(duì)房顫的治療也有效果。本研究的主要目的是通過(guò)對(duì)家兔右心房進(jìn)行快速起搏，從而制作出房顫的動(dòng)物模型，從能量代謝角度觀察曲美他嗪對(duì)家兔心肌細(xì)胞的影響，以期為該藥在房顫領(lǐng)域應(yīng)用提供更多的依據(jù)。
　　方法:選取河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的30只成年NZW家兔，體重2.0-2.3kg，雌雄不限，分為假手術(shù)組（空白組）、生理鹽水組（對(duì)照組）和曲美他

3、嗪組（實(shí)驗(yàn)組）三組，每組為10只。適應(yīng)性喂養(yǎng)家兔3天后，曲美他嗪組給予曲美他嗪8mg/(kg.d)灌胃3周，假手術(shù)組、生理鹽水組給予相同體積的0.9％生理鹽水灌胃3周。經(jīng)家兔耳緣靜脈按照50mg/kg劑量注射10％水合氯醛，成功將家兔麻醉后，仰臥位固定，將兔四肢連接心電圖機(jī)，記錄體表心電圖，于兔頸部正中位切開(kāi)，行氣管插管，成功分離右側(cè)頸內(nèi)靜脈，經(jīng)頸內(nèi)靜脈置入4F雙極電極至右心房，調(diào)整電極位置，當(dāng)BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)顯示大A波、小

4、V波時(shí)，提示電極此時(shí)正處于右心房，遂即固定電極，用蘸有生理鹽水的紗布覆蓋切口，假手術(shù)組不進(jìn)行起搏刺激，而生理鹽水組及曲美他嗪組家兔均進(jìn)行如下操作:以600次/分的頻率對(duì)家兔進(jìn)行8小時(shí)的快速心房起搏。刺激完成后，采用空氣栓塞處死法處死家兔，無(wú)菌條件下，立刻開(kāi)胸，取出心臟，留取新鮮右心房心肌組織塊約0.5g(濕重)，立即置于液氮中保存。制備實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定標(biāo)本中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)

5、含量。
　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析均應(yīng)用SPSS13.0(Statistical Package for theSocial Sciences13.0)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行，計(jì)量資料指標(biāo)均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)，各統(tǒng)計(jì)指標(biāo)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，組間比較采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)資料的方差分析，兩兩比較均采用S-N-K法進(jìn)行比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1、ATP、ADP、AMP定性分離
　　取假

6、手術(shù)組、生理鹽水組溶液和曲美他嗪組色譜圖各一份，分別與標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖比較分析。結(jié)果顯示，10分鐘內(nèi)，ATP、ADP、AMP的峰圖已經(jīng)達(dá)到了有效分離，由標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖可以看出，ATP、ADP、AMP的洗脫時(shí)間分別為6.067min、5.058min、3.901min，假手術(shù)組、生理鹽水組溶液和曲美他嗪組的色譜圖中ATP、ADP、AMP的洗脫時(shí)間幾乎與標(biāo)準(zhǔn)品一致(Fig.1，F(xiàn)ig.2，F(xiàn)ig.3，F(xiàn)ig.4)。
　　2、家兔心肌細(xì)胞內(nèi)A

7、TP、ADP、AMP的定量分析
　　應(yīng)用上述方法，分別將假手術(shù)組、生理鹽水組和曲美他嗪組心肌組織制備成標(biāo)本，進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果(table1)顯示，假手術(shù)組、生理鹽水組和曲美他嗪組的ATP含量分別為32.56±7.37μg/g、19.69±4.73μg/g、28.08±6.76μg/g，ADP含量分別為194.60±29.70μg/g、224.05±31.92μg/g、256.27±23.10μg/g，而AMP含量分別為348.32±

8、75.72μg/g、462.53±88.60μg/g、364.02±55.14μg/g。生理鹽水組與假手術(shù)組相比較，ATP含量減少了39.53％，而ADP、AMP分別增加了15.13％、32.79％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);曲美他嗪組與假手術(shù)組相比，ATP、AMP的含量變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而ADP含量增加了31.69％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;曲美他嗪組與生理鹽水組相比較，曲美他嗪組ATP增加了42.6

9、1％，ADP增加了14.38％，AMP減少了21.30％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、家兔心肌細(xì)胞內(nèi)能荷水平的改變
　　由table2可知，假手術(shù)組、生理鹽水組、曲美他嗪組能荷水平分別為0.23±0.02、0.19±0.02、0.24±0.03。生理鹽水組與假手術(shù)組比較，能荷水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);曲美他嗪組較假手術(shù)組的能荷水平的改變無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;曲美他嗪組和生理鹽水組二者