胚胎肝干細(xì)胞膽向分化的分子標(biāo)志特征及其調(diào)控機(jī)制.pdf

1、肝臟干細(xì)胞是具有肝向和膽向分化潛能的細(xì)胞。作為“干細(xì)胞治療”隊(duì)伍中的重要成員，肝臟干細(xì)胞引起了人們極大的關(guān)注和需求，但肝臟干細(xì)胞的分化特性及其調(diào)控依然是制約肝臟干細(xì)胞臨床治療的應(yīng)用瓶頸。為解析肝臟干細(xì)胞的分化決定和分化定向及其調(diào)控機(jī)制，在本研究中，我們利用懸浮培養(yǎng)法富集了胚胎妊娠期12.5天小鼠胎肝中的成球細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)這群肝細(xì)胞球來(lái)源的細(xì)胞同時(shí)兼具肝臟干細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的特征和分化潛能，提示其為早期胎肝中處于上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epitheli

2、al-mesenchymal transition,EMT）狀態(tài)的胚胎肝臟干細(xì)胞群體。該群體可分為Dlk1+和Dlk1-兩個(gè)細(xì)胞亞群，鑒于膜表面型Dlk1（membrane-bound Dlk1,Dlk1M）和分泌型Dlk1（secretory Dlk1,Dlk1S）兩種異構(gòu)體的存在，我們隨后研究發(fā)現(xiàn)，Dlk1+細(xì)胞同時(shí)表達(dá)Dlk1M和Dlk1S，Dlk1-細(xì)胞僅表達(dá) Dlk1S。進(jìn)一步研究表明Dlk1+細(xì)胞可丟失Dlk1M轉(zhuǎn)變?yōu)镈lk

3、1-細(xì)胞，Dlk1-細(xì)胞仍保持細(xì)胞增殖能力，但其EMT程度增加，具有了膽管前體細(xì)胞樣特性。
　　深入研究發(fā)現(xiàn)，通過構(gòu)建過表達(dá)質(zhì)粒使Dlk1-細(xì)胞重新表達(dá)Dlk1M后，其分化特征得到明顯的逆轉(zhuǎn)，表明Dlk1M具有功能性的調(diào)控作用，并且bFGF在誘導(dǎo)Dlk1+細(xì)胞丟失Dlk1M的轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。此外，對(duì)Dlk1+細(xì)胞和Dlk1-細(xì)胞自噬水平的分析顯示，Dlk1+細(xì)胞在轉(zhuǎn)化為Dlk1-后，自噬水平降低，提示自噬可能在這一胚胎肝臟干