TIEG siRNA對AGEs介導腎小管上皮細胞Smad信號通路的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：觀察TIEGsiRNA對AGEs介導腎小管上皮細胞Smad信號通路的影響。 方法：(1)AGEs對體外培養(yǎng)正常大鼠近端腎小管上皮細胞(NRK52E)Smad信號通路的影響：體外培養(yǎng)NRK52E細胞，無血清化24h后給予AGE-BSA或牛血清白蛋白(BSA)刺激24h和48h，收集細胞。采用免疫細胞化學、PCR和Westernblot的方法測定NRK52E細胞TIEGmRNA、Smad2和Smad7mRNA、Smad2和Sm

2、ad7蛋白表達水平。(2)TIEGsiRNA對AGEs介導NRK52E細胞Smad信號通路的影響：體外培養(yǎng)NRK52E細胞，分別轉染psiRNA-TIEG和空載體，然后給予AGE—BSA刺激24h和48h，收集細胞，采用免疫細胞化學、PCR和Westernblot的方法測定轉染NRK52E細胞TIEGmRNA、Smad2和Smad7mRNA、Smad2和Smad7蛋白表達水平。 結果： (1)AGEs以時間依賴方式上調T

3、IEGmRNA表達，48h達高峰；與刺激前和BSA對照組比較，刺激24h和48h明顯上調Smad2和Smad7mRNA和蛋白表達。 (2)siRNA—TIEG可有效下調AGEs介導的TIEGmRNA表達。與空載體比較，siRNA-TIEG可下調AGEs刺激24h和48h后Smad2mRNA和蛋白表達，上調Smad7mRNA和蛋白表達。 結論：AGEs可介導NRK52E細胞TIEGmRNA異常高表達，TIEG基因沉默通過下

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