阿利吉侖對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟RAAS影響的初步研究.pdf

1、目的:研究阿利吉侖對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）的影響。
　　方法:選取60只5周齡雄性SD健康大鼠，隨機(jī)分為正常對(duì)照組（NC組，n=6）和糖尿病造模組(n=54)，糖尿病組采用高脂高糖喂養(yǎng)聯(lián)合鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)40mg·kg-1腹腔注射的方法造模，72小時(shí)后測(cè)得隨機(jī)血糖≥16.7mmol·L-1為造模成功。檢測(cè)24小時(shí)尿蛋白定量≥30mg·24h-1者為糖尿病腎病(d

2、iabetic kidney disease，DKD)造模成功，總共31只大鼠DKD造模成功并隨機(jī)分為DKD對(duì)照組(DKD組，n=10)，阿利吉侖組（A組，n=11），纈沙坦組（V組，n=10）。A組大鼠給予50mg·kg-1d-1阿利吉侖生理鹽水溶液灌胃，V組給予30 mg·kg-1d-1纈沙坦生理鹽水混懸液灌胃，NC組和DKD組給予等量生理鹽水灌胃，均為一天一次。分別檢測(cè)2、4、6周時(shí)各組大鼠的24小時(shí)尿蛋白定量。6周后統(tǒng)一處死，留

3、取血清，檢測(cè)血清肌酐，取腎組織標(biāo)本測(cè)定腎臟指數(shù)[腎臟重量(g)/體重（kg)]，采用HE染色和PAS染色評(píng)估腎臟病理改變。免疫組化染色檢測(cè)ACE2、MAS受體、AT1R、AT2R在腎臟的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:(1)糖尿病腎病成模時(shí)DKD組、V組、A組小鼠24小時(shí)尿蛋白定量較正常對(duì)照組顯著升高(37.0±5.1mg、36.1±4.9mg、38.0±5.0mg vs.17.7±3.8mg，p＜0.05)，腎臟指數(shù)較NC組明顯升高(14

4、.7±1.0g·kg-1、10.2±0.7g·kg-1、12.8±1.7g·kg-1 vs.5.2±4.2g·kg-1，p＜0.05)，纈沙坦和阿利吉侖治療6周后24小時(shí)尿蛋白定量較DKD組均顯著降低(34.6±7.5mg、37.9±11.1mg vs.61.7±10.3mg，p＜0.05)，兩治療組之間沒有顯著差異（34.6±7.5mgvs.37.9±11.1mg，p＞0.05），纈沙坦比阿利吉侖更有效降低了腎臟指數(shù)(10.2±0.7

5、g·kg-1vs.12.8±1.7g·kg-1，p＜0.05)。NC組、DKD組、V組和A組大鼠血肌酐分別為27.3±3.4umo l·L-1、30.2±4.9umol·L-1、28.6±4.0umol·L-1、27.9±4.2 umol·L-1，各組大鼠血肌酐均無(wú)顯著差異(p＞0.05)。(2)腎臟病理改變:NC組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)正常;DKD組可見不同輕度的腎小球肥大，基底膜節(jié)段性增厚，系膜基質(zhì)增生，少許腎小球發(fā)生萎縮硬化，部分腎小管局

6、灶空泡變性，部分腎小管萎縮，透明管型形成。A組和V組腎臟病理改變較DKD組有不同程度改善。DKD組有16.7％屬于Ⅱa級(jí)病理改變，83.3％屬于Ⅱb級(jí)病理改變。兩治療組中，V組有28.6％屬Ⅰ級(jí)病理改變，71.4％屬于Ⅱ a級(jí)病理改變;A組中有25.0％屬Ⅰ級(jí)病理改變，Ⅱ a級(jí)病理改變和Ⅱb級(jí)病理改變均為37.5％。(3)免疫組化結(jié)果:DKD組大鼠腎臟AT1R、AT2R和ACE2表達(dá)較NC組均明顯升高（AT1R:3.97±0.15vs.

7、3.11±0.20; AT2R:3.48±0.15vs.2.87±0.20; ACE2:3.65±0.25vs.3.19±0.47;p均＜0.05），Mas受體蛋白表達(dá)顯著下降（2.54±0.23 vs.3.08±0.6，p＜0.05）;纈沙坦治療6周后AT1R表達(dá)較DKD組下降（3.48±0.22 vs.3.97±0.15，p＜0.05），ACE2、AT2R和Mas的表達(dá)較DKD組無(wú)明顯改變（ACE:23.69±0.19 vs.3.6

8、5±0.25; AT2R:3.53±0.13vs.3.48±0.15; Mas:2.61±0.15 vs.2.54±0.23;p均＞0.05）;阿利吉侖治療6周后不改變DKD大鼠腎臟AT1R的表達(dá)（3.95±0.16vs.3.97±0.15，p＞0.05），ACE2和AT2R表達(dá)較DKD組下降(AC E2:3.17±0.22 vs.3.65±0.25; AT2R:2.93±0.21vs.3.48±0.15,p均＜0.05),較NC組無(wú)顯

9、著差異（ACE2:3.17±0.22 vs.3.19±0.47; AT2R:2.93±0.21vs.2.87±0.20，p均＞0.05），Mas表達(dá)較DKD組升高（2.96±0.23 vs.2.54±0.23，p＜0.05），較NC組無(wú)顯著差異（2.96±0.23vs.3.08±0.6，p＞0.05）。
　　結(jié)論:(1)阿利吉侖能改善DKD大鼠的腎臟結(jié)構(gòu)和功能;(2)阿利吉侖不改變DKD大鼠腎臟AT1R的表達(dá)，抑制AT2R和ACE