依達(dá)拉奉對COPD大鼠氧化應(yīng)激及肺泡上皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：探索依達(dá)拉奉(EDA)對COPD大鼠氧化應(yīng)激及肺泡上皮細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法：采用隨機(jī)數(shù)字法將30只雄性SD大鼠分為3組，即正常對照組（Control組）、COPD組及依達(dá)拉奉干預(yù)組（EDA組）。COPD組:分別在實(shí)驗(yàn)的第1、14天給予脂多糖200ug/200ul氣道滴入，并于第2至13天、第15至第28天暴露于香煙煙霧中，腹腔注射藥物用生理鹽水代替;依達(dá)拉奉干預(yù)組:采用同樣的方法復(fù)制大鼠COPD模型，于每次煙熏前給予依

2、達(dá)拉奉20mg/kg腹腔注射;正常對照組:不進(jìn)行煙熏，氣道滴入及腹腔注射藥物均以生理鹽水替代。造模4周后取大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)進(jìn)行細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)及細(xì)胞分類，分別使用WST-1及TBA法檢測各組大鼠血漿超氧化物歧化酶活力(SOD)及丙二醛(MDA)水平。蘇木素-伊紅(HE)染色觀察肺組織病理變化，在顯微鏡下(×200)下測量肺泡數(shù)及肺泡間隔數(shù)并通過公式計(jì)算出平均內(nèi)襯間隔和平均肺泡數(shù)，免疫組化檢測CHOP、Caspase-12在肺

3、組織的表達(dá)，TUNEL法檢測肺泡上皮細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)果：⑴一般情況:COPD組大鼠食欲下降、體重下降、活動減少、毛色暗淡，呼吸變的淺快，口唇及四肢紫紺，煙熏時呼吸加快、伴有明顯喘息，驅(qū)趕時反應(yīng)遲鈍，部分大鼠出現(xiàn)嗜睡、煩躁等癥狀;Control組食欲好，體重增加明顯，反應(yīng)迅速，毛色光澤度好，口唇及四肢紅潤;EDA組大鼠一般情況較COPD組大鼠好。⑵各組大鼠支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例:COPD組（4.54±0.11×

4、108/L、20.39±2.34％）與Control組(1.53±0.08×108/L、4.95±0.83％)相比有明顯升高(P＜0.05)，而經(jīng)過依達(dá)拉奉治療后，EDA組(2.55±0.18×108/L、10.6±2.42％)較COPD組明顯下降(P＜0.05)。⑶與Control組（4.38±0.63nmol/L）相比，COPD組(8.14±0.79nmol/L) MDA水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，EDA組（5.

5、67±0.82nmol/L）大鼠血漿MDA水平較COPD組明顯降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與Control組（24.54±1.08 U/ml）相比，COPD組（14.94±2.25U/ml）SOD活性明顯降低(P＜0.05)，經(jīng)過依達(dá)拉奉治療后，EDA組(19.66±1.68U/ml) SOD活性較COPD組升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑷蘇木素-伊紅(HE)染色COPD組大鼠肺組織及氣道可見大量炎性細(xì)胞浸潤及

6、肺泡變大、肺泡結(jié)構(gòu)破壞等表現(xiàn)，EDA組大鼠肺氣腫表現(xiàn)及氣道炎癥程度較COPD組減輕;肺組織形態(tài)學(xué)分析結(jié)果顯示，COPD組平均內(nèi)襯間隔(MLI)及平肺泡數(shù)(MAN)分別為(81.99±6.39×10-6m、89.523±6.99×106/m2)，與Control組（46.14±2.55×10-6m、161.99±7.86×106/m2）比，MLI明顯增加，MAN明顯減少(P＜0.05);經(jīng)過依達(dá)拉奉治療后，EDA組平均內(nèi)襯間隔(MLI)及

7、平肺泡數(shù)(MAN)分別是（63.01±4.85×10-6m、112.85±9.36×106/m2），與COPD組比，MLI明顯減小、MAN明顯增加，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑸肺組織Caspase-12及CHOP免疫組化測定:主要表達(dá)在肺泡上皮細(xì)胞上，COPD組大鼠肺組織Caspase-12及CHOP積分光密度(IOD)值分別為（10150.9±273.9、9884.1±265.9）比Control組（1456.9±87.5

8、、1072.4±136.2）明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);經(jīng)過依達(dá)拉奉治療后，EDA組（6443.9±312.4、6128.9±195.4）IOD值較COPD組明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑹TUNEL法檢測肺泡上皮細(xì)胞凋亡情況:COPD組凋亡指數(shù)(AI)為(40.61±1.86％)，較Control組（10.4±1.17％）明顯升高(P＜0.01)，經(jīng)過依達(dá)拉奉治療后，EDA組（24.75±1.71％）凋亡