ERCC1和XRCC1 SNP與結(jié)直腸癌易感性、藥物敏感性及預(yù)后分析.pdf

1、目的:結(jié)直腸癌是常見惡性腫瘤之一，在我國發(fā)病率呈逐年升高趨勢。研究證實(shí)，個體基因多態(tài)性與腫瘤發(fā)生、腫瘤化療藥物敏感性及毒副反應(yīng)相關(guān)。核酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(excision repair cross complementing1，ERCC1)和X線修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(X-ray repair cross complementaryprotein1，XRCC)是哺乳動物DNA修復(fù)系統(tǒng)主要基因，修復(fù)由內(nèi)外環(huán)境所致的各種DNA損傷，對維持

2、個體的遺傳穩(wěn)定性起著重要作用。其多態(tài)性與腫瘤相關(guān)性、藥物敏感性及預(yù)后相關(guān)。3'非翻譯區(qū)(3'untranslated region，3'UTR)和編碼區(qū)單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)可影響基因的表達(dá)，與腫瘤易感性、藥物敏感性及預(yù)后相關(guān)。本項(xiàng)研究擬探討ERCC1和XRCC1基因3'UTR和編碼區(qū)SNP與結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC)發(fā)病風(fēng)險相關(guān)性及臨床病理聯(lián)系

3、;研究ERCC1和XRCC1 SNP與奧沙利鉑為主要化療方案藥物敏感性及CRC患者預(yù)后相關(guān)性。方法:收集438例晚期大腸癌患者化療前靜脈血并提取DNA，以iMLDR法對ERCC1rs3212986、rs762562、rs735482、rs2336219和XRCC1 Gln399Arg、Arg280His、Arg194Trp SNP位點(diǎn)基因型進(jìn)行分析。采用免疫組化（Immunohistochmeistry, IHC）
　　方法:檢測

4、CRC癌組織中ERCC1和XRCC1蛋白表達(dá)。使用擬合優(yōu)度x2（goodness-of-fitx2）檢驗(yàn)分析各基因多態(tài)性位點(diǎn)分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律。病例-對照組中基因型和等位基因頻率分布差異使用x2檢驗(yàn)(Pearson Chi-Square)或Fisher's Exact Test檢測。采用非條件Logistic回歸模型估算基因多態(tài)性與CRC風(fēng)險、化療療效的關(guān)系。以相對危險度比值比(odds ratio，OR)

5、和95％可信區(qū)間(95％CI)估計(jì)各研究因素與CRC發(fā)病風(fēng)險相關(guān)性。用Kaplan-Meier法，log-rank檢驗(yàn)和Cox回歸模型評估基因多態(tài)性與CRC患者預(yù)后相關(guān)性。使用SHEsis在線軟件(http://analysis.bio-x.cn/SH EsisMain.htm)評估等位基因連鎖不平衡(linkage disequilibrium，LD)。所有數(shù)據(jù)用SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析。以p＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)

6、果:①XRCC1 Arg194Trp和ERCC1 rs2336219與CRC發(fā)病風(fēng)險相關(guān)。攜帶Trp/Trp基因型和Trp等位基因的個體患CRC的風(fēng)險顯著增加(OR=1.432，95％CI，1.195～2.236，p=0.021;OR=1.314，95％CI，1.125～1.646 p=0.025)。與ERCC1 rs2336219 GG基因型和G等位基因相比較，攜帶AA基因型和A等位基因的個體患CRC的風(fēng)險顯著增加(OR=1.459,

7、95％CI,1.143～2.428, P=0.008; OR=1.312,95％CI,1.063～1.627,p=0.007)。②腫瘤位置、浸潤深度、大小、組織學(xué)類型、分化程度和TNM分期均與基因多態(tài)性沒有相關(guān)性(p＞0.05)。攜帶XRCC1 Arg194Trp Trp等位基因的個體淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率顯著增加(p＜0.05）。③XRCC1Arg194Trp和ERCC1 rs735482多態(tài)性與藥物敏感性相關(guān)。攜帶XRCC1Arg194Trp

8、 Trp和ERCC1 rs735482 C等位基因的個體與奧沙利鉑為主的化療方案耐藥顯著相關(guān)。④單倍型分析顯示，XRCC1 Gln399Arg、Arg280His和Arg194Trp三位點(diǎn)存在連鎖不平衡，194Arg/280Arg/399Arg頻率最高。與194Arg/280Arg/399Arg相比，194Trp/280Arg/399Arg單倍型顯著增加個體耐藥性。⑤生存分析顯示，XRCC1Arg194Trp和ERCC1 rs73548

9、2多態(tài)性與患者無病生存率（event-free survival，EFS）和總生存期(Overall survival，OS)顯著相關(guān)。攜帶XRCC1Arg194Trp Trp/Trp和ERCC1 rs735482CC基因型的CRC個體更易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，OS顯著縮短(HR=1.358，95％ CI1.195～1.932，p=0.003;HR=1.301，95％ CI1.408～1.960，p=0.005)。⑥免疫組化結(jié)果顯示，rs7354

10、82多態(tài)性不同基因型個體中ERCC1蛋白表達(dá)有顯著差異，攜帶CC基因型個體ERCC1蛋白表達(dá)顯著增高。
　　結(jié)論:①XRCC1 Arg194Trp Trp/Trp和ERCC1rs2336219 AA基因型顯著增加個體患CRC風(fēng)險。②XRCC1Arg194Trp和ERCC1 rs735482多態(tài)性與奧沙利鉑為基礎(chǔ)的化療藥物敏感性相關(guān)，從而影響患者的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和總生存率。③ERCC1rs735482不同基因型ERCC1蛋白表達(dá)有顯著性差