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文檔簡介
1、背景:
成纖維細胞來源于胚胎組織中胚層,在組織中廣泛分布,近年發(fā)現(xiàn),外在損傷等微環(huán)境刺激可使其轉變有功能的效應細胞;離體培養(yǎng)的成纖維細胞與骨髓間充質干細胞表面標志物類似,多向分化潛能逐漸被人們所認識,可作為細胞工程的種子細胞。然而正常器官的成纖維細胞是否均具有多潛能?不同器官成纖維細胞是否存在差異?離體培養(yǎng)的成纖維細胞的多潛能性與組織是否相同等,目前尚未見比較性研究。
目的:
探討新生大鼠和成年大鼠心、肝、
2、脾、肺、腎和皮膚中成纖維細胞表達nanog蛋白差異及其意義。
方法:
1.免疫組織化學法分別對新生大鼠、成年大鼠心、肝、脾、肺、腎和皮膚中的成纖維細胞進行vimentin標記,以對成纖維細胞進行鑒定;并對各組織成纖維細胞行nanog蛋白標記,比較不同器官中nanog陽性細胞的分布差異;
2.免疫熒光雙標技術分別對新生大鼠、成年大鼠心、肝、脾、肺、腎和皮膚中的成纖維細胞進行nanog和vimentin雙重標記
3、,檢測并比較不同器官中成纖維細胞nanog蛋白表達比率。
3.酶聯(lián)合消化法體外分離培養(yǎng)新生大鼠6種器官中的成纖維細胞,在細胞水平進一步驗證成纖維細胞表達nanog蛋白特征,并與組織相比較。
結果:
1.在新生大鼠每個器官中均有少數(shù)成纖維細胞表達nanog蛋白,其表達率分別為心(10.07±0.77)%、肝(9.97±3.70)%、脾(11.23±2.98)%、肺(15.07±2.87)%、腎(11.75±2
4、.76)%、皮膚(16.14±1.28)%,其中皮膚和肺的表達率高于心、肝、脾、腎(P<0.05);而成年大鼠各器官很少表達nanog,只有肺、脾、腎存在少量表達,新生大鼠和成年大鼠比較,存在明顯差異,P<0.05。
2.新生大鼠分離培養(yǎng)的成纖維細胞純度較高,表達nanog蛋白的細胞數(shù)明顯高于組織。
結論:
1.新生大鼠和成年大鼠心、肝、脾、肺、腎和皮膚的部分成纖維細胞表達nanog蛋白,提示成纖維細胞具有
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