1,3-甘油二酯乳脂對SD大鼠脂肪代謝的影響及其機制研究.pdf

1、本文通過酶法甘油解對普通乳脂進行改性,制備1,3-甘油二酯(1,3-DG)乳脂,并通過SD大鼠飼養(yǎng)試驗進行驗證,探討1,3-DG具有降脂減肥功效及其機制,同時建立了SD大鼠脂肪代謝相關基因相對表達量的檢測方法。
　　1、PCR檢測方法的建立
　　建立運用SYBR Green I嵌合熒光染料定量檢測SD大鼠脂肪代謝相關酶的mRNA的相對定量PCR檢測方法,針對SD大鼠脂肪代謝中的乙酰輔酶A羧化酶(ACC),脂肪酸合成酶(FAS

2、),激素敏感酯酶(HSL),肉堿棕櫚酸轉移酶-I(CPT-I)及管家基因β-actin的序列設計了特異性的引物,建立SYBR Green I嵌合熒光法相對定量PCR檢測方法。此方法無非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生;檢測下限均達10-6,;批內(nèi)及批間變異系數(shù)均小于2.8％,具有特異性強、敏感性高、重復性好等特征.可用于SD大鼠肝臟脂類代謝相關基因mRNA表達量進行了檢測。
　　2、甘油酯改性乳脂的制備
　　選用固定化脂肪酶Lipozyme

3、 RMIM(EC3.1.1.3),全酶法甘油解無溶劑體系中的乳脂,制備含有1,3-DG的甘油酯改性乳脂。反應時間為16.51h,酶添加量為6.41%,反應溫度為51.08℃,水分添加量為4.35%,甘油和乳脂摩爾比為1.33。此時得到的反應產(chǎn)物中1,3-DG的含量為30.21%。
　　3、SD大鼠飼養(yǎng)試驗
　　60只SD大鼠隨機分為基礎對照組、低劑量改性乳脂組、中劑量改性乳脂組、高劑量改性乳脂組、普通乳脂組,8周的飼養(yǎng)試驗后

4、測定體重、血液生化指標及相關基因相對表達量,結果表明:
　　(1)用1,3-DG替代乳脂中的TG具有降低體重、血脂、血糖平均水平的功效,且會使得血液游離脂肪酸增加。
　　(2)不具有調節(jié)總膽固醇代謝的功效,但其中HDL-C含量上升,LDL-C含量下降。
　　(3)1,3-DG比TG可顯著降低肝臟FAS、ACC的表達,使得脂肪酸的從頭合成減弱,減少脂肪積累;同時,1,3-DG比TG可顯著增加CPT-I的表達量,從而促進脂