琥珀酸美托洛爾早期干預(yù)對心肌梗死兔心臟的保護作用及機制研究.pdf

1、心血管病死亡占我國居民總死亡原因的首位，心肌梗死(MI)后并發(fā)的室顫等惡性心律失常是引起心臟性猝死(SCD)的主要原因。
　　目的：
　　探討琥珀酸美托洛爾早期干預(yù)對兔心肌梗死40天后心臟組織縫隙連接重構(gòu)以及細胞凋亡的影響。
　　方法：
　　將24只成年雄性新西蘭大白兔隨機分成假手術(shù)組（SH組，n=6）、心肌梗死組(MI組，n=6)、心梗后早期干預(yù)組（EBMI組，n=6）和心梗后常規(guī)干預(yù)組（RBMI組，n=6），

2、通過結(jié)扎冠狀動脈前降支建立心肌梗死模型，假手術(shù)組不結(jié)扎血管，余操作均相同。EBMI組和RBMI組分別于麻醉清醒后和心梗24小時后以琥珀酸美托洛爾（12.5mg/kg，溶于2ml蒸餾水）灌胃，SH組和MI組以等量蒸餾水灌胃。術(shù)后6小時，以生物化學(xué)法檢測血清心肌壞死標(biāo)志物（血清乳酸脫氫酶和肌酸激酶）水平。術(shù)后40天開胸暴露心臟，通過雙極起搏電極測定心室顫動閾值;以免疫熒光法觀察縫隙連接蛋白43(Cx43)及其磷酸化(p-Cx43)和縫隙連接

3、蛋白45(Cx45)在心室肌組織的分布情況，TUNEL法測定心肌細胞凋亡率，Western blot法檢測心室肌組織Cx43、p-Cx43、Cx45和Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表達水平;實時熒光定量PCR法測定心肌組織中Cx43及Cx45的mRNA表達水平。
　　結(jié)果：
　　1、心肌梗死組的血清乳酸脫氫酶和肌酸激酶水平均高于假手術(shù)組(P均＜0.01);
　　2、MI組的心室顫動閾值低于SH組(P＜0.0

4、5)，EBMI組和RBMI組心室顫動閾值均高于MI組（P均＜0.05）。
　　3、縫隙連接蛋白在心室肌的分布情況：SH組、EBMI組和RBMI組可見CX43主要位于閏盤內(nèi)，與細胞長軸垂直，呈線狀排列，而側(cè)向分布的Cx43相對較少，MI組則相反;p-Cx43和Cx45的分布表現(xiàn)與Cx43相似。
　　4、心肌組織中縫隙連接蛋白的表達：(1)蛋白表達水平：MI組p-Cx43和Cx45表達水平以及p-Cx43/Cx43比例均低于SH

5、組(P均＜0.05);EBMI組和RBMI組p-Cx43和Cx45表達水平以及p-Cx43/Cx43比例均高于MI組（P均＜0.05），且EBMI組高于RBMI組(P＜0.05);各組CX43總蛋白的灰度分析無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。(2)mRNA表達水平：MI組Cx43和Cx45的mRNA表達水平低于SH組（P均＜0.05）;EBMI組和RBMI組Cx43和Cx45的mRNA表達水平均高于MI組（P均＜0.05），且EBMI組高于

6、RBMI組(P＜0.05)。
　　5、凋亡相關(guān)檢測：(1)TUNEL法：MI組心肌細胞凋亡率明顯高于SH組(P＜0.05)，EBMI組和RBMI組的心肌細胞凋亡率低于MI組(P均＜0.05)，且EBMI組低于RBMI組(P＜0.05);(2)凋亡相關(guān)蛋白表達水平：MI組的Bcl-2水平及Bcl-2/Bax比值低于SH組（P均＜0.05），EBMI組和RBMI組的Bcl-2水平及Bcl-2/Bax比值高于MI組（P均＜0.05），且

7、EBMI組高于RBMI組(P＜0.05);MI組的Bax和Caspase-3水平高于SH組（P均＜0.05），而EBMI組和RBMI組的Bax和Caspase-3水平低于MI組（P均＜0.05），且EBMI組低于RBMI組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　琥珀酸美托洛爾通過改善心梗后心室肌縫隙連接蛋白的空間分布，減少縫隙連接蛋白的降解及去磷酸化，降低心梗后惡性心律失常的易感性，抑制心肌細胞凋亡，從而對心肌梗死兔心臟起保護作