環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A對(duì)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞SGK1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　建立人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外培養(yǎng)模型，探討B(tài)PA對(duì)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞SGK1表達(dá)的影響，為進(jìn)一步研究BPA是否通過(guò)SGK1干擾子宮內(nèi)膜容受性而導(dǎo)致不孕提供依據(jù)。
　　材料與方法:
　　構(gòu)建人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外混合培養(yǎng)方法;實(shí)驗(yàn)設(shè)對(duì)照組及BPA組。對(duì)照組使用常規(guī)DEME/F12培養(yǎng)液;BPA組分為3組，分別為DEME/F12培養(yǎng)液中加終濃度為0.01 ug/mlBPA、0.1 ug/mlB PA、1ug/mlBPA。BP

2、A干預(yù)時(shí)間為24小時(shí)。檢查細(xì)胞形態(tài)，同時(shí)進(jìn)行角蛋白和波形蛋白免疫熒光染色，為實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行提供體外混合人子宮內(nèi)膜細(xì)胞。利用免疫熒光方法測(cè)定4組SGK1蛋白表達(dá)情況。通過(guò)熒光定量PCR技術(shù)，檢測(cè)4組子宮內(nèi)膜細(xì)胞上基因SGK1的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　離體培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜細(xì)胞，接種24 h后細(xì)胞大多能貼壁。上皮細(xì)胞角蛋白呈陽(yáng)性表達(dá)，波形蛋白呈陰性表達(dá);間質(zhì)細(xì)胞波形蛋白呈陽(yáng)性表達(dá)，角蛋白表達(dá)陰性。人子宮內(nèi)膜細(xì)胞存在SGK1